Question

【題目】回答下列有關(guān)生物技術(shù)與基因表達(dá)的問題

如圖所示為利用現(xiàn)代生物技術(shù)獲得能表達(dá)某蛋白酶工程菌的過程及工程菌表達(dá)目的基因的模式圖。選用的質(zhì)粒A上有I、II、III、IV四種限制酶切割位點(diǎn)。

（1）據(jù)圖推斷過程①獲取目的基因時，應(yīng)選用的限制酶是______________。過程②是利用___________酶將目的基因與運(yùn)載體連接形成重組質(zhì)粒。過程③為重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體細(xì)胞，如受體細(xì)胞為小鼠受精卵，則選用的常規(guī)方法是_______________。

（2）如同時用酶I和酶IV切割圖中質(zhì)粒A，產(chǎn)生1.8kb和8.2kb的兩種片段（1kb=1000對堿基對），如用四種酶同時切割質(zhì)粒A，則產(chǎn)生0.6kb和8.2kb兩種片段，那么用同時用酶II和酶IV切割質(zhì)粒A，則產(chǎn)生的片段有____________。

（3）過程⑤表示______________過程，其需要的原料是_______________。

Answer 1

【答案】II和III DNA連接酶 顯微注射 1.2kb和8.8kb 轉(zhuǎn)錄 四種游離的核糖核苷酸

【解析】

本題旨在考查基因工程與基因表達(dá)的相關(guān)知識。分析題圖：①提取目的基因，②目的基因與運(yùn)載體結(jié)合，③將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞，④目的基因的表達(dá)，⑤目的基因表達(dá)過程中的轉(zhuǎn)錄；選用的質(zhì)粒A上有I、II、III、IV四種限制酶切割位點(diǎn)，獲取目的基因的DNA分子上有I、II、III三種限制酶切割位點(diǎn)，選用I限制酶切割位點(diǎn)將會破壞目的基因，故選用II、III兩種限制酶切割目的基因與運(yùn)載體質(zhì)粒。

（1）質(zhì)粒A上有I、II、III、IV四種限制酶切割位點(diǎn)，獲取目的基因的DNA分子上有I、II、III三種限制酶切割位點(diǎn)，據(jù)圖推斷過程①獲取目的基因時，選用I限制酶切割位點(diǎn)將會破壞目的基因，故選用II、III兩種限制酶；兩種來源不同的DNA用同種限制酶切割后，末端互補(bǔ)的堿基可以連接起來，脫氧核糖和磷酸交替連接而構(gòu)成的DNA 骨架上的缺口，需要靠DNA連接酶來“縫合”，將目的基因與運(yùn)載體連接形成重組質(zhì)粒。重組質(zhì)粒導(dǎo)入動物受體細(xì)胞，選用的常規(guī)方法是顯微注射法。

（2）如同時用酶I和酶IV切割圖中質(zhì)粒A，產(chǎn)生1.8kb和8.2kb的兩種片段（1kb=1000對堿基對），說明質(zhì)粒上含有10000個堿基對；如用四種酶同時切割質(zhì)粒A，則產(chǎn)生0.6kb和8.2kb兩種片段，則說明酶I和酶II、酶II和酶III、酶III和酶IV切割位點(diǎn)間的都含有600個堿基對，那么同時用酶II和酶IV切割質(zhì)粒A，則產(chǎn)生的片段有600+600=1200對堿基（酶II、酶III和酶IV之間的堿基）和8200+600=8800對堿基（酶IV、酶Ⅰ和酶II之間的堿基），故則產(chǎn)生的片段有1.2kb和8.8kb。

（3）過程⑤遺傳信息傳遞的過程為DNA→RNA，表示轉(zhuǎn)錄過程，其需要的原料是四種游離的核糖核苷酸。