Question

【題目】研究表明，HER2/neu是一種原癌基因，它表達(dá)的H蛋白在多種惡性腫瘤特別是乳腺癌細(xì)胞中過量表達(dá)�？�H蛋白單克隆抗體能抑制過量表達(dá)H蛋白的乳腺癌細(xì)胞的生長，目前已成為有效的生物治療手段。

（1）原癌基因的作用是____________________。

（2）H蛋白是一個(gè)跨膜蛋白，結(jié)構(gòu)如圖所示。制備免疫小鼠用的H蛋白（抗原）時(shí)，應(yīng)構(gòu)建胞外區(qū)基因，轉(zhuǎn)入原核細(xì)胞表達(dá)并提純。選擇胞外區(qū)的原因是_________________。為了擴(kuò)增出大量胞外區(qū)需要用到PCR技術(shù)。常規(guī)PCR技術(shù)一般包括變性、退火、延伸等步驟，退火的目的是________________________。設(shè)計(jì)引物是PCR技術(shù)的關(guān)鍵步驟之一，某同學(xué)設(shè)計(jì)的兩組引物如下表所示。_________（填“引物對A”或“引物對B”）設(shè)計(jì)不合理，并說出不合理的理由：______________________________________。

引物對A	P1 AAGCCGGGCGCGCCCGGAA P2 TTCGGCCCGCGTTATGCGCG
引物對B	S1 GTCCGCTAGTGGCTGTG S2 AGCTGGCGTTTAGCCTCG

（3）制備抗H蛋白單克隆抗體時(shí)，需將H蛋白注射到小鼠體內(nèi)。這樣做的目的是_____________________________。制備抗H蛋白單克隆抗體時(shí)，需要用到細(xì)胞融合技術(shù)，該技術(shù)的主要優(yōu)點(diǎn)是_____________________________________。

（4）治療乳腺癌時(shí)，方法之一是單獨(dú)使用抗H蛋白單克隆抗體，試寫出治療乳腺癌的另一種療效高、毒副作用小的、不損傷正常細(xì)胞的方法：________________。

Answer 1

【答案】調(diào)節(jié)細(xì)胞周期，控制細(xì)胞生長和分裂的進(jìn)程 由于抗體主要存在于細(xì)胞外液中．制備獲得的抗體作用于該抗原的胞外區(qū) 引物與模板發(fā)生堿基互補(bǔ)配對 引物對A 引物P1自身堿基互補(bǔ)配對，引物P1和P2部分發(fā)生堿基互補(bǔ)配對 使小鼠體內(nèi)產(chǎn)生相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞 突破有性雜交方法的局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能 將該單克隆抗體與抗癌藥物結(jié)合構(gòu)建“生物導(dǎo)彈”，注入體內(nèi)，殺死癌細(xì)胞

【解析】

人和動(dòng)物細(xì)胞的染色體上本來就存在著與癌有關(guān)的基因：原癌基因和抑癌基因。環(huán)境中的致癌因子會(huì)損傷細(xì)胞中的DNA分子，使原癌基因和抑癌基因發(fā)生突變，導(dǎo)致正常細(xì)胞的生長和分裂失控而變成癌細(xì)胞。

PCR技術(shù)是一種體外迅速擴(kuò)增DNA片段的技術(shù)，能以極少量的DNA為模板，在幾小時(shí)內(nèi)復(fù)制出上百萬份的DNA拷貝。引物是一小段DNA或RNA，它能與DNA母鏈的一段堿基序列互補(bǔ)配對，作用是使DNA聚合酶能從引物的3’端開始連接脫氧核苷酸。

單克隆抗體的制備過程：對小鼠注射特定的抗原蛋白，免疫小鼠以獲得相應(yīng)B淋巴細(xì)胞，利用誘導(dǎo)因子將鼠的骨髓瘤細(xì)胞與已免疫的B淋巴細(xì)胞融合，用特定選擇培養(yǎng)基篩選雜交瘤細(xì)胞，再進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測獲得能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞，體外大規(guī)模培養(yǎng)即可提取單克隆抗體。

（1）原癌基因的作用是負(fù)責(zé)調(diào)節(jié)細(xì)胞周期，控制細(xì)胞生長和分裂的進(jìn)程。

（2）由于抗體主要存在于細(xì)胞外液中，制備獲得的抗體作用于該抗原的胞外區(qū)，因此構(gòu)建胞外區(qū)基因，轉(zhuǎn)入原核細(xì)胞表達(dá)并提純，作為抗原注射到小鼠體內(nèi)。PCR利用了DNA的熱變性原理，通過控制溫度來控制雙鏈的解聚與結(jié)合，其中退火的目的是降低溫度使引物與模板發(fā)生堿基互補(bǔ)配對。分析表格中兩對引物可知，引物對A不合理，因?yàn)橐�物�?/span>A中P1自身堿基互補(bǔ)配對，引物P1和P2部分發(fā)生堿基互補(bǔ)配對，不利于PCR過程引物與目的基因的結(jié)合。

（3）在制備單克隆抗體時(shí)，將H蛋白注射到小鼠體內(nèi)的目的是使小鼠體內(nèi)產(chǎn)生相應(yīng)的B淋巴細(xì)胞，還需要用到細(xì)胞融合技術(shù)，細(xì)胞融合技術(shù)的優(yōu)點(diǎn)是突破了有性雜交方法的局限，使遠(yuǎn)緣雜交成為可能。

（4）單克隆抗體具有特異性強(qiáng)、靈敏度高，并可能大量制備的特點(diǎn)，在治療乳腺癌時(shí)，可將該單克隆抗體與抗癌藥物結(jié)合構(gòu)建“生物導(dǎo)彈”，注入體內(nèi)，殺死癌細(xì)胞。