Question

20．農(nóng)業(yè)科技工作者在煙草中找到了一抗病基因，現(xiàn)擬采用基因工程技術(shù)將該基因轉(zhuǎn)入棉花，培育抗病棉花品系．請回答下列問題．
（1）要獲得該抗病基因，可采用從物種中分離（或從基因文庫）、人工合成等方法．
（2）要使載體與該抗病基因連接，首先應(yīng)使用限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）進(jìn)行切割．假如載體被切割后，得到的分子末端序列為，則能與該載體連接的抗病基因分子末端是圖中的A．

（3）切割完成后，采用DNA連接酶酶將載體與該抗病基因連接，在構(gòu)建的基因表達(dá)載體中，除含有目的基因外，還必須有啟動子、終止子和標(biāo)記基因．
（4）再將連接得到的重組DNA分子導(dǎo)入農(nóng)桿菌，然后用該農(nóng)桿菌去感染棉花細(xì)胞，從而將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞，要鑒定受體細(xì)胞中是否導(dǎo)入目的基因，可根據(jù)標(biāo)記基因表達(dá)出來的性狀來確定，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來，再利用植物細(xì)胞具有的全能性特點進(jìn)行組織培養(yǎng)，培育出的轉(zhuǎn)基因植物，要檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA上是否插入目的基因，檢測的方法是采用DNA分子雜交技術(shù)．
（5）該抗病基因在棉花細(xì)胞中表達(dá)的產(chǎn)物是C．
A．淀粉B．脂類C．蛋白質(zhì)D．核酸．

Answer 1

分析 1、基因工程至少需要三種工具：限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）、DNA連接酶、運載體．
2、基因工程的基本操作步驟主要包括四步：①目的基因的獲取；②基因表達(dá)載體的構(gòu)建；③將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞；④目的基因的檢測與鑒定．
3、植物組織培養(yǎng)技術(shù)的原理是植物細(xì)胞具有全能性．

解答 解：（1）抗病基因?qū)儆谀康幕�因，獲取目的基因的方法：從物種中分離、化學(xué)方法人工合成等．
（2）構(gòu)建基因表達(dá)載體時，需先用限制酶切割運載體和含有目的基因的外源DNA分子．含有相同黏性末端的DNA分子片段才能在DNA連接酶的作用下連接起來，若載體被切割后，得到的分子末端序列為，則能與該載體連接的抗病基因分子末端是．
（3）切割完成后，采用DNA連接酶酶將載體與該抗病基因連接，在構(gòu)建的基因表達(dá)載體中，除含有目的基因外，還必須有啟動子、終止子和標(biāo)記基因．
（4）要鑒定受體細(xì)胞中是否導(dǎo)入目的基因，可根據(jù)標(biāo)記基因表達(dá)出來的性狀來確定，從而將含有目的基因的細(xì)胞篩選出來，再利用植物細(xì)胞具有的全能性特點進(jìn)行組織培養(yǎng)，培育出的轉(zhuǎn)基因植物，要檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA上是否插入目的基因，檢測的方法是采用DNA分子雜交技術(shù)．
（5）基因表達(dá)是指轉(zhuǎn)錄、翻譯形成蛋白質(zhì)，因此該抗病基因在棉花細(xì)胞中表達(dá)的產(chǎn)物是蛋白質(zhì)．
故答案為：
（1）從物種中分離（或從基因文庫）   人工合成
（2）限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）   A
（3）DNA連接酶     啟動子    終止子    標(biāo)記基因
（4）標(biāo)記基因表達(dá)出來的性狀    全能    DNA分子雜交技術(shù)  
（5）C

點評 本題考查基因工程、植物組織培養(yǎng)的相關(guān)內(nèi)容，要求考生掌握基因工程常用的三種工具及作用；識記基因工程的操作步驟；識記植物組織培養(yǎng)的原理及應(yīng)用，能結(jié)合所學(xué)的知識答題，屬于考綱識記和理解層次的考查．