Question

【題目】下圖為將人的生長(zhǎng)激素基因?qū)�入�?xì)菌B細(xì)胞內(nèi)制“工程菌“的示意圖。已知細(xì)菌B細(xì)胞內(nèi)不含質(zhì)粒A，也不含質(zhì)粒A上的基因。請(qǐng)完成下列題目：

（1）圖中從質(zhì)粒A到重組質(zhì)粒，需要的工具酶有________________、__________________。

（2）圖中目的基因?yàn)?/span>_________________，為方便后續(xù)能表達(dá)出正確的產(chǎn)物，該目的基因的方法最好通過(guò)________________（從基因組文庫(kù)中、PCR擴(kuò)增、反轉(zhuǎn)錄法）獲取。

（3）將完成導(dǎo)入過(guò)程的細(xì)菌涂布在含有______________的培養(yǎng)基上，目的是__________。

（4）若某細(xì)菌在含有四環(huán)素和氨芐青霉素的培養(yǎng)基上存活，則可能原因?yàn)?/span>_____________。（不考慮突變，答出一點(diǎn)即可）

Answer 1

【答案】限制酶 DNA連接酶 （人的）生長(zhǎng)激素基因 反轉(zhuǎn)錄法 氨芐青霉素 篩選出含有重組質(zhì)粒（或目的基因）的大腸桿菌 導(dǎo)入的DNA為未連接目的基因的質(zhì)粒 / 導(dǎo)入的DNA為自身環(huán)化的質(zhì)粒

【解析】

分析題圖：圖示表示將人的生長(zhǎng)激素基因?qū)�入�?xì)菌B細(xì)胞內(nèi)制造“工程菌”的過(guò)程。質(zhì)粒A上含有四環(huán)素抗性基因和氨芐青霉素抗性基因，構(gòu)建基因表達(dá)載體后，破環(huán)了質(zhì)粒A的四環(huán)素抗性基因，但氨芐青霉素抗性基因正常，所以導(dǎo)入重組質(zhì)�；蚱胀ㄙ|(zhì)粒的大腸桿菌都能抗氨芐青霉素，但導(dǎo)入重組質(zhì)粒的大腸桿菌不能抗四環(huán)素。

（1）圖中從質(zhì)粒A到重組質(zhì)粒，需要對(duì)目的基因的切割和連接在質(zhì)粒中，所以需要的工具酶有限制酶和DNA連接酶。

（2）圖中目的基因?yàn)槿说纳�長(zhǎng)激素基因，為方便后續(xù)能表達(dá)出正確的產(chǎn)物，獲取該目的基因的方法最好通過(guò)反轉(zhuǎn)錄法，因?yàn)榉崔D(zhuǎn)錄的目的基因不含內(nèi)含子，能在原核細(xì)胞內(nèi)得以正確表達(dá)。

（3）結(jié)合前面的分析可知，將完成了導(dǎo)入過(guò)程的細(xì)菌涂布在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上，目的是為了淘汰沒(méi)有導(dǎo)入質(zhì)粒的細(xì)菌，從而篩選出含有重組質(zhì)粒（或目的基因）的大腸桿菌。

（4）若某細(xì)菌在含有四環(huán)素和氨芐青霉素的培養(yǎng)基上存活，則說(shuō)明導(dǎo)入細(xì)菌內(nèi)的質(zhì)粒中完整的四環(huán)素抗性基因和氨芐青霉素抗性基因，可能的原因是導(dǎo)入的DNA為未連接目的基因的質(zhì)粒或?qū)�入的DNA為自身環(huán)化的質(zhì)粒。