18．為實(shí)現(xiàn)目的基因與運(yùn)載體結(jié)合，以便在大腸桿菌中大量表達(dá)相應(yīng)的蛋白質(zhì)，研究人員進(jìn)行了如圖所示操作．請(qǐng)分析回答下列問題：

（1）圖表示用BamH I切割含目的基因的DNA片段，質(zhì)粒經(jīng)相同限制酶處理后，經(jīng)DNA連接酶的作用獲得a，a稱作基因表達(dá)載體（重組質(zhì)粒）．將a與感受態(tài)大腸桿菌混合后，混合物應(yīng)接種在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上．質(zhì)粒中抗氨芐青霉素基因稱為標(biāo)記基因，在篩選過程起作用．若要證明培養(yǎng)基是否符合實(shí)驗(yàn)要求，培養(yǎng)基上需接種未經(jīng)質(zhì)粒混合的感受態(tài)大腸桿菌，培養(yǎng)后不出現(xiàn)菌落則培養(yǎng)基合格．
（2）DNA分子中，一條鏈中的兩個(gè)核苷酸通過磷酸二酯鍵相連，已知堿性磷酸酶能除去核苷酸末端的5’磷酸，構(gòu)建a的過程中用該酶處理質(zhì)粒，但目的基因不用堿性磷酸酶處理，這樣做的目的是防止質(zhì)粒自我連接．如果要檢測(cè)目的基因 是否成功表達(dá)，須提取培養(yǎng)后大腸桿菌的總蛋白，用相應(yīng)抗體檢測(cè)．

分析 基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲�。悍椒ㄓ袕幕蛭膸�(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成．
（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等．
（3）將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)胫参锛?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)胛⑸锛?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法．
（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．

解答 解：（1）圖表示用BamHI為限制性內(nèi)切酶，能識(shí)別特定的堿基序列，切割含目的基因的DNA片段，質(zhì)粒經(jīng)相同限制酶處理后，形成的黏性末端相同，經(jīng)DNA連接酶酶的作用獲得基因表達(dá)載體，也叫重組質(zhì)粒．由于質(zhì)粒中含有標(biāo)記基因抗氨芐青霉素基因，故將重組質(zhì)粒與感受態(tài)大腸桿菌混合后，混合物應(yīng)接種在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上．在篩選過程起作用，導(dǎo)入重組質(zhì)粒的大腸桿菌能正常生活，而未導(dǎo)入重組質(zhì)粒的大腸桿菌則不能在含氨芐青霉素的培養(yǎng)基上生活．若要證明培養(yǎng)基是否符合實(shí)驗(yàn)要求，需設(shè)置對(duì)照試驗(yàn)，即培養(yǎng)基上需接種未經(jīng)質(zhì)�；旌系母惺軕B(tài)大腸桿菌，培養(yǎng)后不出現(xiàn)菌落則培養(yǎng)基合格．
（2）DNA分子中，一條鏈中的兩個(gè)核苷酸通過磷酸二酯鍵相連；構(gòu)建a的過程中用該酶處理質(zhì)粒，但目的基因不用堿性磷酸酶處理，這樣做的目的是使它們形成的黏性末端不同，防止質(zhì)粒自我連接．檢測(cè)目的基因是否成功表達(dá)，須提取培養(yǎng)后大腸桿菌的總蛋白，通過抗原抗體雜交試驗(yàn)，用相應(yīng)抗體檢測(cè)．
故答案為：
（1）DNA片段    DNA連接酶   基因表達(dá)載體（重組質(zhì)粒）  氨芐青霉素     標(biāo)記基因     未經(jīng)質(zhì)粒混合
（2）磷酸二酯鍵    防止質(zhì)粒自我連接   總蛋白

點(diǎn)評(píng) 本題考查基因工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的操作工具及具體的操作步驟，掌握各步驟中的相關(guān)細(xì)節(jié)，能結(jié)合題干信息準(zhǔn)確答題，屬于考綱識(shí)記和理解層次的考查．

練習(xí)冊(cè)系列答案
相關(guān)習(xí)題

科目：高中生物 來源： 題型：解答題

8．蠶豆體細(xì)胞染色體數(shù)為2N=12，用3H標(biāo)記蠶豆根尖細(xì)胞DNA，在染色體水平上探究DNA的復(fù)制方式，實(shí)驗(yàn)過程如下：
I．將蠶豆幼苗培養(yǎng)在含有3H的胸腺嘧啶脫氧核苷酸的培養(yǎng)基上，培養(yǎng)一段時(shí)間后，觀察染色體的放射情況．
II．當(dāng)DNA分子雙鏈都被標(biāo)記后，再將根移到含有秋水仙素的非放射性培養(yǎng)基中，培養(yǎng)一段時(shí)間后，觀察染色體的放射情況．
（1）觀察染色體應(yīng)選擇有絲分裂中期時(shí)期的細(xì)胞，秋水仙素誘導(dǎo)染色體加倍的作用機(jī)理是抑制紡錘體的形成，使分開的染色體不能進(jìn)入子細(xì)胞．
（2）在I中，在細(xì)胞進(jìn)行第一次分裂時(shí)，每條染色體上有放射性的染色單體有2條，每個(gè)DNA分子中，有1條鏈有放射性．在 II中，若觀察到一個(gè)細(xì)胞具有24條染色體，且二分之一的染色單體有放射性，則表明該細(xì)胞染色體在無放射性培養(yǎng)基上復(fù)制了2次，含有4個(gè)染色體組．
（3）上述實(shí)驗(yàn)表明DNA分子的復(fù)制方式是半保留復(fù)制．

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科目：高中生物 來源： 題型：解答題

9．研究發(fā)現(xiàn)某湖泊中小球藻為水蚤提供食物，對(duì)河蚌消化道內(nèi)的食物進(jìn)行分析，發(fā)現(xiàn)既有小球藻也有水蚤，水蚤可以被魚甲捕食，魚甲又可被魚乙所捕食（魚甲和魚乙生活的水體空間相同）．回答下列問題：
（1）請(qǐng)畫出以上生物之間的食物網(wǎng)簡(jiǎn)圖．
（2）從生態(tài)系統(tǒng)的組成成分分析，除上述成分外，此湖泊生態(tài)系統(tǒng)還應(yīng)該包括分解者、非生物的物質(zhì)和能量；魚甲和魚乙之間的關(guān)系是捕食和競(jìng)爭(zhēng)．
（3）已知各營(yíng)養(yǎng)級(jí)之間的能量傳遞效率為10%，若魚甲的同化量是M，水蚤同化的能量為 N，則（M÷N）×100%＜（填“＞”、“=”、“＜”）10%，原因是水蚤同化的能量中還有一部分傳遞給河蚌．
（4）農(nóng)業(yè)生產(chǎn)使用的化肥、農(nóng)藥有一部分隨著水流最終匯入湖泊，但并未對(duì)其生物的種類和數(shù)量造成很大的影響，說明該 湖泊生態(tài)系統(tǒng)具有一定的自我調(diào)節(jié)能力，其抵抗力穩(wěn)定性較強(qiáng)．
（5）隨著生態(tài)環(huán)境的改善，該湖泊現(xiàn)已成為鳥類的樂園．當(dāng)?shù)卦啻闻e辦觀鳥攝影大賽、濕地科普知識(shí)展等系列活動(dòng)，這體現(xiàn)了生物多樣性的直接價(jià)值．

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科目：高中生物 來源： 題型：解答題

6．如圖所示人體激素調(diào)節(jié)過程據(jù)圖回答有關(guān)問題
（1）正常機(jī)體血液中激素②的合成量過多時(shí)，激素①、③的含量變化趨勢(shì)是下降，這是一種（負(fù)）反饋調(diào)
節(jié)機(jī)制．
（2）人的體溫調(diào)節(jié)中樞位于下丘腦：在寒冷環(huán)境中，②的分泌量增加．
（3）由圖可知細(xì)胞內(nèi)氧氣和葡萄糖濃度的比值減小時(shí)，會(huì)促進(jìn)胰島素激素合成加快：
乳酸的含量變化是調(diào)控細(xì)胞內(nèi)胰島素原基因表達(dá)的信號(hào)．
（4）當(dāng)血糖濃度高于180mg/dl時(shí)，部分葡萄糖隨尿液排出體外．該過程影響腎臟對(duì)水的重吸收從而導(dǎo)致尿量增多，此時(shí)收集尿液并加入班氏試劑，經(jīng)加熱后尿液顏色呈磚紅色．

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科目：高中生物 來源： 題型：解答題

13．癌癥干細(xì)胞理論認(rèn)為，“癌癥干細(xì)胞”是癌細(xì)胞發(fā)展、轉(zhuǎn)移和治療后復(fù)發(fā)的根源．實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，如果恢復(fù)“癌癥干細(xì)胞”中的“l(fā)et-7基因”的轉(zhuǎn)錄，“癌癥干細(xì)胞”的自我增殖能力將顯著下降，原理如圖．請(qǐng)分析回答：

（1）在培養(yǎng)“癌癥干細(xì)胞”時(shí)，培養(yǎng)液中應(yīng)加入一定量的抗生素以防止污染．為避免細(xì)胞代謝產(chǎn)物積累對(duì)自身造成的危害，應(yīng)采取的措施是定期更換培養(yǎng)液．培養(yǎng)過程中可使用胰蛋白（膠原蛋白）酶處理貼壁細(xì)胞，以便分瓶進(jìn)行傳代培養(yǎng)．
（2）“l(fā)et-7基因”恢復(fù)轉(zhuǎn)錄的原因可能是通過修飾RNA聚合酶識(shí)別和結(jié)合的位點(diǎn)，使之恢復(fù)驅(qū)動(dòng)“l(fā)et-7基因”的轉(zhuǎn)錄功能；用分子雜交法可直接檢測(cè)“l(fā)et-7基因”是否轉(zhuǎn)錄，當(dāng)“l(fā)et-7基因”恢復(fù)轉(zhuǎn)錄時(shí)，“癌癥干細(xì)胞”中核糖體的活動(dòng)減弱（填“不變”、“增強(qiáng)”或“減弱”）；“癌癥干細(xì)胞”的自我增殖能力下降的原因可能是癌蛋白（填“癌基因mRNA”或“癌蛋白”）減少．

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科目：高中生物 來源： 題型：選擇題

3．細(xì)胞中存在兩種類型的基因，一類是管家基因，是指所有細(xì)胞中均要表達(dá)的基因；還有一類是奢侈基因，是指不同類型細(xì)胞中特異性表達(dá)的基因．下列表述不合理的是（　　）
A．催化ATP合成的酶是由管家基因指導(dǎo)合成的
B．奢侈基因在同一個(gè)體不同細(xì)胞中一般是不同的
C．組成管家基因和奢侈基因的脫氧核苷酸種類相同
D．奢侈基因的特異性表達(dá)可賦予細(xì)胞特定的功能

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科目：高中生物 來源： 題型：選擇題

10．以下有關(guān)細(xì)胞生命歷程的敘述，錯(cuò)誤的是（　�。�
A．細(xì)胞增殖是生物個(gè)體發(fā)育的基礎(chǔ)
B．已分化細(xì)胞不再具有增殖的潛能
C．細(xì)胞凋亡有助于維持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)態(tài)
D．組織中細(xì)胞的增殖、分化和凋亡可同時(shí)存在

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科目：高中生物 來源： 題型：解答題

7．下丘腦與人體內(nèi)許多生理活動(dòng)的調(diào)節(jié)密切相關(guān)．圖中甲、乙、丙表示下丘腦的某些區(qū)域，A、B、C表示不同的調(diào)節(jié)途徑．請(qǐng)據(jù)圖回答：
（1）人在炎熱的環(huán)境中，汗腺分泌增強(qiáng)，這是下丘腦通過A（填字母）途徑調(diào)節(jié)的．在參與該調(diào)節(jié)過程的結(jié)構(gòu)中，下丘腦中的該區(qū)域稱為體溫調(diào)節(jié)中樞（只寫中樞不得分）．
（2）當(dāng)人大量出汗時(shí)，會(huì)導(dǎo)致細(xì)胞外液滲透壓（只寫滲透壓不得分）升高，位于下丘腦乙（填“甲”、“乙”或“丙”）中的滲透壓感受器興奮，進(jìn)而促進(jìn)了抗利尿激素激素的合成與分泌．
（3）能夠體現(xiàn)激素分級(jí)調(diào)節(jié)的是C（填字母）途徑，圖中所示該過程中的內(nèi)分泌腺可以是甲狀腺（或性腺、腎上腺皮質(zhì)）（寫出一種）．

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科目：高中生物 來源： 題型：選擇題

8．種群是生物進(jìn)化的基本單位，下列有關(guān)種群及生物進(jìn)化的敘述，正確的是（　�。�
A．只有突變和基因重組才能導(dǎo)致種群的基因頻率發(fā)生改變
B．被捕食者大多是年老、病弱或年幼的個(gè)體，利于種群的發(fā)展
C．自然選擇直接作用于個(gè)體的基因型，并決定了生物的進(jìn)化方向
D．研究種群間差異的關(guān)鍵是它們能否出現(xiàn)地理隔離和形成生殖隔離

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