Question

【題目】血紅蛋白的提取與分離：

①將洗滌好的紅細胞倒入燒杯中，加入蒸餾水和甲苯，其中加入甲苯的目的是___________。

②利用凝膠色譜法分離蛋白質，常選用血紅蛋白為材料，其原因是_____________________，該方法的基本原理是根據(jù)____________________ （蛋白質特性）而達到蛋白質分離，蛋白質的提取和分離一般分為四步：樣品處理、____________________。

③下圖1是凝膠色譜法分離血紅蛋白時樣品的加入示意圖，正確的加樣順序是____________。如果紅色區(qū)帶__________________，說明色譜柱制作成功。

④一同學通過血紅蛋白醋酸纖維薄膜電泳，觀察到正常人和鐮刀型細胞貧血癥患者的血紅蛋白電泳結果如下圖所示。由圖可知攜帶者有2種血紅蛋白，從分子遺傳學的角度作出的解釋是_____________________

Answer 1

【答案】加速紅細胞的破裂并釋放出血紅蛋白 取材容易，本身有色便于觀察 相對分子質量的大小 粗分離、純化和純度鑒定 ④①②③ 均勻一致地移動 攜帶者具有(控制血紅蛋白的)一對等位基因，可以控制合成兩種不同的蛋白質

【解析】

血紅蛋白的提取與分離的實驗步驟主要有：（1）樣品處理：①紅細胞的洗滌，②血紅蛋白的釋放，③分離血紅蛋白溶液。（2）粗分離：①分離血紅蛋白溶液，②透析。（3）純化：調節(jié)緩沖液面→加入蛋白質樣品→調節(jié)緩沖液面→洗脫→收集分裝蛋白質。（4）純度鑒定--SDS聚丙烯酰胺凝膠電泳。

①將洗滌好的紅細胞倒入燒杯中，加入蒸餾水和甲苯，其中加入甲苯的目的是加速紅細胞的破裂并釋放出血紅蛋白。

②由于血紅蛋白取材容易，本身有色便于觀察，常作為利用凝膠色譜法分離蛋白質的材料；凝膠色譜法分離蛋白質的基本原理是根據(jù)相對分子質量的大小而達到蛋白質分離，蛋白質的提取和分離一般分為四步：樣品處理、粗分離、純化和純度鑒定。

③據(jù)圖分析，凝膠色譜法分離血紅蛋白時樣品的加入的正確的順序是調整緩沖液面、滴加透析樣品、樣品滲入凝膠床、再調整緩沖液面，即④①②③；如果紅色區(qū)帶均勻一致地移動，說明色譜柱制作成功。

④據(jù)圖分析可知，攜帶者有2種血紅蛋白，其原因是攜帶者具有一對等位基因，可以控制合成兩種不同的蛋白質。