Question

【題目】如圖表示分離、純化及保存枯草芽孢桿菌菌株的簡要過程，回答下列問題：
（1）將土壤表層泥土稀釋液煮沸15min后獲得的樣品中，仍然含有一些活的菌種，原因是 ．
（2）圖中將菌種接種到平板1的方法是；將菌種接種到平板2之前，接種工具常用法進行滅菌．為了逐步分離、純化得到目的菌種，平板1和平板2中的培養(yǎng)類型都應該屬于培養(yǎng)基．對于使用頻繁的菌種可接種到上圖試管中的培養(yǎng)基上臨時保藏．
（3）用稀釋涂布平板法在5個平板上都接種稀釋倍數為104的樣品液0.1mL，培養(yǎng)一段時間后，平板長出來的菌落數分別為182、160、168、175和190，據此推測，每mL樣品液中的細菌數量為個．稀釋涂布平板法能夠通過統(tǒng)計平板上的菌落數來推測樣品中的活菌數目，原因是 ．

Answer 1

【答案】
（1）煮沸消毒法不能殺死細菌的全部芽孢和孢子
（2）稀釋涂布平板法；灼燒滅菌（灼燒）；選擇；固體斜面
（3）1.75×107；當樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌
【解析】解：（1）煮沸消毒法不能殺死細菌的全部芽孢和孢子，因此土壤表層泥土稀釋液煮沸15min后獲得的樣品中，仍然含有一些活的菌種．（2）分析圖解可知，圖示平板1利用涂布棒進行涂布稀釋，即圖中將菌種接種到平板1的方法為稀釋涂布平板法；將菌種接種到平板2之前，接種工具常用灼燒滅菌（灼燒）法進行滅菌．為了逐步分離、純化得到目的菌種，平板1和平板2中的培養(yǎng)類型都應該屬于選擇培養(yǎng)基．對于使用頻繁的菌種可接種到上圖試管中的固體斜面培養(yǎng)基上臨時保藏．（3）用稀釋涂布平板法在5個平板上都接種稀釋倍數為104的樣品液0.1mL，培養(yǎng)一段時間后，平板長出來的菌落數分別為182、160、168、175和190，據此推測，每mL樣品液中的細菌數量=（182+160+168+175+190）÷5÷0.1×104=1.75×107個．當樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌，因此稀釋涂布平板法能夠通過統(tǒng)計平板上的菌落數來推測樣品中的活菌數目． 故答案為：（1）煮沸消毒法不能殺死細菌的全部芽孢和孢子；（2）稀釋涂布平板法；灼燒滅菌（灼燒）；選擇；固體斜面；（3）1.75×107；當樣品的稀釋度足夠高時，培養(yǎng)基表面生長的一個菌落，來源于樣品稀釋液中的一個活菌
1、無菌技術的主要內容：①對實驗操作的空間、操作者的衣著和手，進行清潔和消毒；②將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等器具進行滅菌③為避免周圍環(huán)境中微生物的污染，實驗操作應在酒精燈火焰附近進行；④實驗操作時應避免已經滅菌處理的材料用具與周圍的物品相接觸．2、消毒和滅菌：

比較項目	理化因素的作用強度	消滅微生物的數量	芽孢和孢子能否被消滅
消毒	較為溫和	部分生活狀態(tài)的微生物	不能
滅菌	強烈	全部微生 物	能

·3、微生物常見的接種的方法：①平板劃線法：將已經熔化的培養(yǎng)基倒入培養(yǎng)皿制成平板，接種，劃線，在恒溫箱里培養(yǎng)．在線的開始部分，微生物往往連在一起生長，隨著線的延伸，菌數逐漸減少，最后可能形成單個菌落．②稀釋涂布平板法：將待分離的菌液經過大量稀釋后，均勻涂布在培養(yǎng)皿表面，經培養(yǎng)后可形成單個菌落．