Question

【題目】某校實(shí)驗(yàn)小組對某種品牌的酸奶中乳酸菌的數(shù)量進(jìn)行了測定。取6支滅菌的試管，分別加入9mL滅菌的生理鹽水，標(biāo)號為B1、B2、B3、B4、B5、B6；吸取1mL酸奶樣液加入試管B1中，混合均勻；然后另取一支吸管從B1中吸取1mL溶液，加入B2中，依次類推，最后從試管B6中取0.1mL樣液進(jìn)行涂布計(jì)數(shù)，涂布三個平板，其菌落數(shù)分別為251、265、276個。

請回答下列問題：

（1）培養(yǎng)乳酸菌除了必要的________________外，還需在培養(yǎng)基中添加維生素。

（2）制備乳酸菌的培養(yǎng)基過程中，對培養(yǎng)皿滅菌的常用方法是________________；待平板冷凝后，要將平板倒置，其目的是________________________。

（3）該實(shí)驗(yàn)小組對乳酸菌接種所采用的方法是________________。根據(jù)酸奶樣品的稀釋倍數(shù)和接種稀釋液的體積，統(tǒng)計(jì)平板上的________；根據(jù)三個平板中菌落數(shù)，可推測原酸奶中乳酸菌的濃度為________個/mL，該方法測定的乳酸菌的含量和實(shí)際值相比，一般________（填“偏大”或“偏小”）。

（4）為了使測量結(jié)果更加準(zhǔn)確，該實(shí)驗(yàn)對照組的設(shè)置是________________。

Answer 1

【答案】 營養(yǎng)物質(zhì) 干熱滅菌法 防止平板冷凝后，培養(yǎng)皿蓋上凝結(jié)的水珠落入培養(yǎng)基中造成污染 稀釋涂布平板法 菌落數(shù)目 2.64×109 偏小 另增設(shè)一組培養(yǎng)基，接種等量滅菌的無菌水，其他操作均相同

【解析】試題分析：根據(jù)題意，經(jīng)過6次稀釋，每次在1毫升前一次培養(yǎng)液中加入9毫升生理鹽水稀釋，相當(dāng)于每次都將前一次的培養(yǎng)液稀釋10倍，所以最后的計(jì)數(shù)培養(yǎng)液與最先的培養(yǎng)液相比，共稀釋了106倍。

（1）培養(yǎng)乳酸菌除了必要的碳源、氮源、水、無機(jī)鹽等營養(yǎng)物質(zhì)外，還需在培養(yǎng)基中添加維生素。

（2）對培養(yǎng)皿滅菌的常用方法是干熱滅菌法，對培養(yǎng)基滅菌常用高壓蒸汽滅菌。為了防止平板冷凝后，培養(yǎng)皿蓋上凝結(jié)的水珠落入培養(yǎng)基中造成污染，要將平板倒置。

（3）為了對稀釋的培養(yǎng)液中的乳酸菌的活菌計(jì)數(shù)，該實(shí)驗(yàn)小組所采用的方法是稀釋涂布平板法，根據(jù)酸奶樣品的稀釋倍數(shù)和接種稀釋液的體積，統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)。結(jié)合前面的分析可得，每毫升原酸奶中乳酸菌個數(shù)=（251+265+276）÷3×106÷0.1=2.64×109。該方法測定的乳酸菌的含量一般比實(shí)際值小， 因?yàn)樗��?jì)數(shù)的菌落數(shù)有可能是由兩個或多個細(xì)菌繁殖為一個菌落。

（4）為了排除培養(yǎng)過程中被雜菌污染帶來測量結(jié)果不準(zhǔn)確，通常采取另增設(shè)一組培養(yǎng)基，接種等量滅菌的無菌水，其他操作均相同的對照組來避免。