Question

已知玉米因受到玉米螟危害而減產(chǎn)，玉米螟食用某種原核生物分泌的?-蛋白后死亡．因此，可將?-蛋白基因轉(zhuǎn)入到玉米體內(nèi)，使玉米獲得抗玉米螟危害的能力．請(qǐng)據(jù)此回答下列問(wèn)題：
（1）為了獲得?-蛋白的基因，在已知?-蛋白的氨基酸序列的基礎(chǔ)上，推測(cè)出?-蛋白的序列，據(jù)此可利用

 

方法合成目的基因．獲得?-蛋白的基因還可用

 

、

 

方法．
（2）如圖，若用限制酶E和F從原核生物基因組DNA上切下?-蛋白的基因，并將之取代質(zhì)粒Z1上相應(yīng)的E-F區(qū)域 （0.4kb，1kb=1000對(duì)堿基）．（圖中E、F、G、H是4種識(shí)別序列完全不同的限制酶及其部分識(shí)別位點(diǎn)）
①此時(shí)所形成的重組質(zhì)粒Z2的大小為5.4kb，問(wèn)目的基因的大小是

 

；
②若用限制酶E和F處理Z2，則會(huì)出現(xiàn)Z2

 

；
A．既能被E也能被F切開(kāi)           B．能被E但不能被F切開(kāi)
C．既不能被E也不能被F切開(kāi)       D．能被F但不能被E切開(kāi)
③若用限制酶G切割Z1，可得到一種2.5kb的DNA片段；若用限制酶G切割Z2，可得到2.5kb、1.4kb和0.1kb三種片段，問(wèn)Z2上有

 

個(gè)限制酶G識(shí)別位點(diǎn)．
（3）若用含有重組質(zhì)粒的土壤農(nóng)桿菌直接感染玉米植株的根部傷口，則該植株的種子中

 

（填“含有”或“不含”）?-蛋白基因．

Answer 1

考點(diǎn)：基因工程的原理及技術(shù)

專題：

分析：1、獲得目的基因的方法：①?gòu)幕�因文�?kù)中獲�、诶�用PCR技術(shù)擴(kuò)增③人工合成（化學(xué)合成）．原核基因采取直接分離獲得，真核基因是人工合成．
2、農(nóng)桿菌特點(diǎn)：易感染雙子葉植物和裸子植物，對(duì)單子葉植物沒(méi)有感染力；Ti質(zhì)粒的T-DNA可轉(zhuǎn)移至受體細(xì)胞，并整合到受體細(xì)胞的染色體上．

解答： 解：（1）目的基因較小，而且核苷酸序列已知的情況，可以用人工合成法合成目的基因．還可以通過(guò)基因文庫(kù)中直接獲取、PCR技術(shù)擴(kuò)增目的基因．
（2）①根據(jù)圖示．Z2由Z1中的EF段被目的基因替換而成的．假設(shè)目的基因的大小為Xkb，根據(jù)圖示可知：3.2+0.8+0.6+x=5.4，可得x=0.8kb．
②構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)用同種限制酶切割目的基因和質(zhì)粒，使它們具有相同的末端，再用DNA連接酶鏈接形成重組質(zhì)粒．由Z2的形成過(guò)程圖，可知，?-蛋白的基因是用限制酶E和F從原核生物基因組DNA上切下，并取代質(zhì)粒Z1上相應(yīng)的E-F區(qū)域．如果用限制酶E和F處理Z2，可能E、F兩處位點(diǎn)再次被切開(kāi)．
③已知重組質(zhì)粒Z2的大小為5.4kb，若用限制酶G切割Z2，可得到2.5kb、1.4kb和0.1kb三種片段，可推知共產(chǎn)生四各片段分別為：一段為2.5kb、兩段為1.4kb和一段為0.1kb，因此限制酶G將環(huán)狀的Z2切割四個(gè)位點(diǎn)，獲得如上的三種片段．
（3）農(nóng)桿菌易感染雙子葉植物和裸子植物，對(duì)單子葉植物沒(méi)有感染力．
故答案為：
（1）人工合成　基因文庫(kù)　   PCR
（2）①0.8kb   ②A      ③4     
（3）不含

點(diǎn)評(píng)：本題著重考查了基因工程相關(guān)方面的知識(shí)，意在考查考生能識(shí)記并理解所學(xué)知識(shí)的要點(diǎn)，把握知識(shí)間的內(nèi)在聯(lián)系，形成一定知識(shí)網(wǎng)絡(luò)的能力，并且具有一定的分析能力和理解能力．