Question

8．表是用于從土壤中分離純化土壤細菌的培養(yǎng)基的配方．請回答：

試劑	牛肉膏	蛋白胨	NaCl	瓊脂	水	-
用量	5g	10g	5g	20g	1000mL	-

（1）培養(yǎng)基的類型很多，但培養(yǎng)基中一般都含有水、碳源、氮源和無機鹽．上述培養(yǎng)基配方中能充當碳源的成分是牛肉膏和蛋白胨．培養(yǎng)基配制完成以后，一般還要調(diào)節(jié)pH并對培養(yǎng)基進行滅菌處理．
（2）分離純化微生物最常使用的接種方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法．
（3）假設(shè)培養(yǎng)結(jié)束后，發(fā)現(xiàn)培養(yǎng)基上菌落連成一片，可能的原因是什么？（列舉兩項）稀釋倍數(shù)不夠，菌液的濃度太高；劃線時，劃完第一次沒有滅菌即接著劃第二次；培養(yǎng)過程滅菌不嚴格，受到微生物的污染．

Answer 1

分析 培養(yǎng)基為微生物提供生長、繁殖和積累代謝產(chǎn)物的營養(yǎng)物質(zhì)．營養(yǎng)物質(zhì)歸納為碳源、氮源、生長因子、無機鹽和水．根據(jù)化學成分分為合成培養(yǎng)基、天然培養(yǎng)基等根據(jù)用途分選擇培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基．根據(jù)性質(zhì)分為液體、半固體和固體培養(yǎng)基．

解答 解：（1）培養(yǎng)基中都應含有水、無機鹽、碳源、氮源．培養(yǎng)基配制完成后要調(diào)pH和滅菌．牛肉膏、蛋白胨中含碳元素，可作為有機碳源．
（2）分離純化微生物用平板劃線法或稀釋涂布平板法．
（3）稀釋涂布平板時，稀釋倍數(shù)不夠，菌液的濃度太高；劃線時，劃完第一次沒有滅菌即接著劃第二次；培養(yǎng)過程滅菌不嚴格，受到微生物的污染等原因，都會導致培養(yǎng)結(jié)束后，培養(yǎng)基上菌落連成一片．
故答案為：
（1）氮源　牛肉膏和蛋白胨　滅菌
（2）平板劃線法　稀釋涂布平板法
（3）稀釋倍數(shù)不夠，菌液的濃度太高；劃線時，劃完第一次沒有滅菌即接著劃第二次；培養(yǎng)過程滅菌不嚴格，受到微生物的污染

點評 本題主要考查微生物的培養(yǎng)和分離，要求考生能夠識記培養(yǎng)基的成分，識記分離純化微生物的兩種方法，意在強化學生對相關(guān)知識的識記和理解，提高學生的實驗技能．