Question

12．如圖是利用生物工程的方法生產(chǎn)人血清白蛋白的示意圖．圖中展示了人血清白蛋白基因和質(zhì)粒上的限制酶酶切位點及質(zhì)粒上的抗生素抗性基因，其中amp^R和tet^R分別為氨芐青霉素抗性基因和四環(huán)素抗性基因．圖中展示的限制酶切割產(chǎn)生的黏性末端均不相同．據(jù)圖回答：

（1）早期的基因工程操作都用原核生物作為受體細胞，是由于原核生物具有一些其他生物沒有的特點：繁殖快、多為單細胞、遺傳物質(zhì)相對較少．
（2）為了防止酶切產(chǎn)物自身環(huán)化等現(xiàn)象，通常采用雙（單/雙）酶切處理目的基因和載體，據(jù)圖應選擇EcoRⅠ和HindⅢ限制酶．
（3）為了篩選含有表達載體的大腸桿菌，應將轉(zhuǎn)化產(chǎn)物先涂布在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，一段時間后，將培養(yǎng)基中存活的菌落按照原有位置接種在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)．最后根據(jù)在兩種培養(yǎng)基中的培養(yǎng)狀況來選擇，應選擇能夠在含氨芐青霉素培養(yǎng)基中生存而在含四環(huán)素培養(yǎng)基中不能生存的菌落作為后期研究對象．
（4）為了避免每次基因工程育種，可利用克隆技術(shù)來培育具有產(chǎn)生人血清白蛋白的小鼠，通過該技術(shù)產(chǎn)生的個體與供體的遺傳物質(zhì)基本相同（“完全相同”、“基本相同”）．
（5）為了提高已有的胚胎的利用率，可采用胚胎分割技術(shù)，若操作對象是囊胚，則要注意將內(nèi)細胞團均等分割．

Answer 1

分析 分析題圖：由于質(zhì)粒上沒有限制酶AluⅠ和Sau3A的切割位點，因此選擇限制酶EcoRⅠ和HindⅢ．圖示涉及的技術(shù)包括基因工程技術(shù)、早期胚胎培養(yǎng)技術(shù)、胚胎移植技術(shù)等．

解答 解：（1）由于原核生物具有一些其他生物沒有的特點，如繁殖快、多為單細胞、遺傳物質(zhì)相對較少等，因此早期的基因工程操作都用原核生物作為受體細胞．
（2）單酶切割會導致自身環(huán)化和反向連接，因此為了防止酶切產(chǎn)物自身環(huán)化等現(xiàn)象，通常采用雙酶切處理目的基因和載體；由于質(zhì)粒上沒有限制酶AluⅠ和Sau3A的切割位點，因此選擇限制酶EcoRⅠ和HindⅢ．
（3）用限制酶EcoRⅠ和HindⅢ切割時，會破壞四環(huán)素抗性基因，但不會破壞氨芐青霉素抗性基因，因此為了篩選含有表達載體的大腸桿菌，應將轉(zhuǎn)化產(chǎn)物先涂布在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，一段時間后，將培養(yǎng)基中存活的菌落按照原有位置接種在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基中進行培養(yǎng)．最后根據(jù)在兩種培養(yǎng)基中的培養(yǎng)狀況來選擇，應選擇能夠在含氨芐青霉素培養(yǎng)基中生存而在含四環(huán)素培養(yǎng)基中不能生存的菌落作為后期研究對象．
（4）核移植產(chǎn)生的克隆動物的細胞核遺傳物質(zhì)來自供核生物，而細胞質(zhì)遺傳物質(zhì)來自提供細胞質(zhì)的生物，因此克隆動物的遺傳物質(zhì)與供體基本相同，而不是完全相同．
（5）為了提高已有的胚胎的利用率，可采用胚胎分割技術(shù)，若操作對象是囊胚，則要注意將內(nèi)細胞團均等分割，否則會影響分割后胚胎的恢復和進一步發(fā)育．
故答案為：
（1）繁殖快、多為單細胞、遺傳物質(zhì)相對較少
（2）雙    EcoRⅠ和HindⅢ
（3）氨芐青霉素    四環(huán)素    能夠在含氨芐青霉素培養(yǎng)基中生存而在含四環(huán)素培養(yǎng)基中不能生存
（4）基本相同
（5）胚胎分割    內(nèi)細胞團均等分割

點評 本題結(jié)合圖解，考查基因工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的原理及操作步驟，掌握各操作步驟中需要注意的細節(jié)，能結(jié)合圖中信息準確答題．