Question

【題目】2019年7月21日，國內(nèi)首只商業(yè)化克隆貓經(jīng)代孕貓自然分娩順利出生�？寺∝埓笏馀嘤�的大體過程如圖所示，回答下列問題：

（1）受體細(xì)胞通常需要培養(yǎng)至____________________________（時(shí)期）

（2）圖中細(xì)胞核供體在培養(yǎng)過程中要用胰蛋白酶處理，這說明細(xì)胞間的物質(zhì)成分為______________，能否用胃蛋白酶代替胰蛋白酶？并說明其原因：________________。

（3）重組細(xì)胞在早期胚胎培養(yǎng)液中培養(yǎng)至囊胚期，此時(shí)若想獲得胚胎干細(xì)胞（ES）可以取______________進(jìn)行培養(yǎng)欲使ES細(xì)胞維持不分化狀態(tài)，需在培養(yǎng)液中添加______________。

（4）若想利用早期胚胎獲得更多同種克隆貓可利用________技術(shù)，所選代孕貓應(yīng)滿足的條件是_________。

Answer 1

【答案】MⅡ（減數(shù)第二次分裂）中期 蛋白質(zhì) 不能，動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的最適pH為7．2~7．4，胃蛋白酶的適宜pH為2，胃蛋白酶在pH為7．2~7．4的動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液中無活性 （囊胚）內(nèi)細(xì)胞團(tuán) 抑制因子 胚胎分割 同種、健康、生理狀態(tài)相同的其他雌貓

【解析】

1.動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)時(shí)，取幼齡動(dòng)物的組織，剪碎后，用胰蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞，制成細(xì)胞懸浮液，轉(zhuǎn)入細(xì)胞培養(yǎng)液中進(jìn)行的培養(yǎng)是原代培養(yǎng)；當(dāng)細(xì)胞貼滿瓶壁，在用胰蛋白酶處理分散成單個(gè)細(xì)胞，制成細(xì)胞懸浮液，轉(zhuǎn)入培養(yǎng)液中進(jìn)行的是傳代培養(yǎng)。

2.胚胎移植是指將雌性動(dòng)物的早期胚胎，或者通過體外受精及其他方式得到的胚胎，移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其他雌性動(dòng)物的體內(nèi)，使之繼續(xù)發(fā)育為新個(gè)體的技術(shù)。

3.在體細(xì)胞克隆動(dòng)物的過程中，取動(dòng)物的體細(xì)胞培養(yǎng)，取10代以內(nèi)的供體細(xì)胞的核，從屠宰的母畜體內(nèi)獲取卵母細(xì)胞作為受體細(xì)胞培養(yǎng)至減數(shù)第二次分裂的中期，顯微操作去掉卵母細(xì)胞的核，然后去核的 卵母細(xì)胞與供體細(xì)胞的核進(jìn)行核移植，形成重組細(xì)胞，體外培養(yǎng)重組細(xì)胞發(fā)育形成早起胚胎，然后進(jìn)行胚胎移植，移植到同種、生理狀態(tài)相同的雌性動(dòng)物的體內(nèi)繼續(xù)發(fā)育，發(fā)育成熟后產(chǎn)下的動(dòng)物即克隆動(dòng)物，該技術(shù)利用了動(dòng)物細(xì)胞核的全能性。

（1）根據(jù)以上分析可知，受體細(xì)胞卵母細(xì)胞培養(yǎng)至減數(shù)第二次分裂的中期。

（2）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)過程中需要用胰蛋白酶處理，水解細(xì)胞間的物質(zhì)，根據(jù)酶的專一性特點(diǎn)可知細(xì)胞間的物質(zhì)為蛋白質(zhì)，不能用胃蛋白酶替代胰蛋白酶處理，因?yàn)閯?dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的最適pH為7.2~7.4，胃蛋白酶的適宜pH為2左右，胃蛋白酶在pH為7.2~7.4的動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液中失活。

（3）胚胎干細(xì)胞的來源有：可以取自囊胚時(shí)期的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)的細(xì)胞或者取自胎兒的原始性腺，因此若想獲得胚胎干細(xì)胞（ES）可以取囊胚時(shí)期的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)的細(xì)胞進(jìn)行培養(yǎng)，欲使ES細(xì)胞維持不分化狀態(tài)，需在培養(yǎng)液中添加抑制因子。

（4）若想利用早期胚胎獲得更多同種克隆貓可利用胚胎分割技術(shù)，胚胎移植中所選代孕貓應(yīng)滿足的條件是同種、健康、生理狀態(tài)相同的其他雌貓。