Question

10．某實(shí)驗(yàn)小組欲從豆油污染的土壤中篩選出高效降解脂肪的菌株．請依據(jù)題意回答：
（1）在篩選過程中，應(yīng)將土壤樣品稀釋液接種于以豆油（或脂肪）為唯一碳源的固體培養(yǎng)基上，從功能上講，該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基．
（2）為避免培養(yǎng)基污染，需將培養(yǎng)皿呈倒置狀態(tài)放置．為避免培養(yǎng)液中菌體濃度過高，需將培養(yǎng)液進(jìn)行梯度稀釋（或系列稀釋）處理．為了排除培養(yǎng)基被污染，需設(shè)置接種等量無菌水的培養(yǎng)基作為空白對(duì)照．
（3）為了篩選出菌株，可將適量的蘇丹Ⅲ（或蘇丹Ⅳ）試劑滴加在平板中的菌落周圍，洗去浮色后，如果菌落周圍出現(xiàn)透明圈，則說明此種菌能夠分泌脂肪酶．
（4）純化菌種時(shí)，為了對(duì)活菌計(jì)數(shù)，常采用稀釋涂布平板法接種于新的培養(yǎng)基平板上．

Answer 1

分析 1、培養(yǎng)基的營養(yǎng)構(gòu)成：各種培養(yǎng)基一般都含有水、碳源、氮源和無機(jī)鹽．
2、培養(yǎng)基的分類：①按物理性質(zhì)分，分為液體培養(yǎng)基和固體培養(yǎng)基，固體培養(yǎng)基中含有凝固劑，一般是瓊脂．②按化學(xué)成分分，分為天然培養(yǎng)基和合成培養(yǎng)．兩者的區(qū)別是天然培養(yǎng)基成分不確定，合成培養(yǎng)基成分的含量是確定的．③按用途分，分為選擇培養(yǎng)基和鑒別培養(yǎng)基．
3、消毒和滅菌

	消毒	滅菌
概念	使用較為溫和的物理或化學(xué)方法殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物（不包芽孢和孢子）	使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所用的微生物（包括芽孢和孢子）
常用方法	煮沸消毒法、巴氏消毒法、化學(xué)藥劑消毒法、紫外線消毒法	灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌
適用對(duì)象	操作空間、某些液體、雙手等	接種環(huán)、接種針、玻璃器皿、培養(yǎng)基等

4、接種最常用的方法是平板劃線法和稀釋涂布平板法．接種的目的是使聚集在一起的微生物分散成單個(gè)細(xì)胞，并在培養(yǎng)基表面形成單個(gè)細(xì)菌繁殖而成的子細(xì)胞群體--菌落．

解答 解：（1）欲篩選出能降解豆油的菌株，培養(yǎng)基中應(yīng)只含有豆油而無其它碳源，不能降解豆油的細(xì)菌在此培養(yǎng)基上不能生存，從功能上講，這類培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基．
（2）為避免培養(yǎng)皿污染，需將培養(yǎng)皿呈倒置狀態(tài)放置．為避免培養(yǎng)液中菌體濃度過高，需將培養(yǎng)液進(jìn)行梯度稀釋處理．為了排除實(shí)驗(yàn)過程中的雜菌污染對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的影響，需設(shè)置接種等量無菌水的培養(yǎng)基作為空白對(duì)照．
（3）由于脂肪遇蘇丹Ⅳ試劑會(huì)出現(xiàn)紅色，所以為了篩選出菌株，可將適量的蘇丹Ⅳ試劑滴加在平板中的菌落周圍，洗去浮色后，如果菌落周圍的現(xiàn)象是出現(xiàn)透明圈、不出現(xiàn)紅色圈，則說明此種菌能夠分泌脂肪酶．
（4）接種微生物常用稀釋涂布平板法和平板劃線法，其中稀釋涂布平板法可用于活菌計(jì)數(shù)．
故答案為：
（1）豆油（或脂肪）    選擇    
（2）倒置    梯度稀釋（或系列稀釋）    無菌水
（3）蘇丹Ⅲ（或蘇丹Ⅳ）    透明圈    
（4）稀釋涂布平板

點(diǎn)評(píng) 本題考查微生物的分離和培養(yǎng)，要求考生識(shí)記無菌技術(shù)，掌握接種微生物常用的兩種方法，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題．