Question

【題目】研究表明從母瘤分離脫落的癌細胞首先要與正常細胞粘附才能轉(zhuǎn)移。 為研究不同濃度物質(zhì) X 對癌細胞與毛細血管內(nèi)皮細胞間粘附的影響，請根據(jù)以下提供的實驗 材料與用具，完善實驗思路，預(yù)測實驗結(jié)果并進行分析與討論。

材料與用具：培養(yǎng)瓶若干個、液體培養(yǎng)基、300μg/ml 的物質(zhì) X、癌細胞細胞株、內(nèi)皮細 胞懸液、CO2 培養(yǎng)箱、PBS 溶液（用于洗去未粘附的細胞）

（要求與說明：物質(zhì) X 用液體培養(yǎng)基配制，不考慮培養(yǎng)液成分變化對培養(yǎng)物的影響；實 驗條件適宜）

（1）實驗思路：

①取培養(yǎng)瓶若干個均分為三組，分別加入等量且適量的液體培養(yǎng)基和內(nèi)皮細胞懸液， 置于 37℃的 CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng) 24h，使培養(yǎng)瓶中鋪滿單層內(nèi)皮細胞。

② ______________________________________________。

③同時分別取等量的癌細胞轉(zhuǎn)入上述培養(yǎng)瓶中。置于 37℃的 CO2 培養(yǎng)箱中培養(yǎng)一段 時間。

④用 PBS 溶液洗去未貼壁的細胞，測定相關(guān)值并計算細胞粘附率。

⑤___________________________________________。

（2）實驗結(jié)果：正常對照組的粘附率為 100%，與正常對照組相比，加入物質(zhì) X 后，癌細 胞與內(nèi)皮細胞間的粘附率明顯降低，且 X 濃度越高，癌細胞與內(nèi)皮細胞間的粘附率 下降越明顯。請繪制柱狀圖表示上述結(jié)果___________________________ 。

（3）分析與討論

①實驗用的癌細胞細胞株可以通過_____法建立。獲取癌細胞時需用_____________________處理癌細胞株，將癌細胞轉(zhuǎn)入含內(nèi)皮細胞的培養(yǎng)瓶后所進行的培養(yǎng)稱為______________ 培養(yǎng)。

②導(dǎo)致癌細胞從母瘤分離脫落的原因可能是_______________。根據(jù)實驗可推測： 物質(zhì) X 可能是通過減少腫瘤細胞與毛細血管內(nèi)皮細胞的粘附率，來達到_______________的作用。

Answer 1

【答案】加入用液體培養(yǎng)基配制的低、高兩種不同濃度的物質(zhì) X（或濃度為 150 和 300μg/ml)，對照組加入等體積的液體培養(yǎng)基 對實驗數(shù)據(jù)進行分析與處理 柱形圖如下： 【答題空4】克隆培養(yǎng)法 胰蛋白酶（胰酶） 傳代 癌細胞膜表面粘連蛋白（糖蛋白）減少 抑制癌細胞轉(zhuǎn)移

【解析】

本題考查了探究不同濃度物質(zhì)X對癌細胞與毛細血管內(nèi)皮細胞間粘附的影響，意在考察考生設(shè)置對照組和實驗組的能力，分析實驗結(jié)果得出實驗結(jié)論的能力。

（1）實驗思路：

①取培養(yǎng)瓶若干個均分為三組，分別加入等量且適量的液體培養(yǎng)基和內(nèi)皮細胞懸液，置于37℃的CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h，使培養(yǎng)瓶中鋪滿單層內(nèi)皮細胞。

②加入用液體培養(yǎng)基配制不同濃度的物質(zhì)X（濃度為150和300μg/ml），對照組加入等體積的液體培養(yǎng)基。

③同時分別取等量的癌細胞轉(zhuǎn)入上述培養(yǎng)瓶中，置于37℃的CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)一段時間。

④用PBS溶液洗去未貼壁的細胞，測定相關(guān)值并計算細胞粘附率。

⑤對實驗數(shù)據(jù)進行分析與處理。

（2）實驗結(jié)果：正常對照組的粘附率為100%，與正常對照組相比，加入物質(zhì)X后，癌細胞與內(nèi)皮細胞間的粘附率明顯降低，且X濃度越高，癌細胞與內(nèi)皮細胞間的粘附率下降越明顯。請繪制柱狀圖表示上述結(jié)果。如下：

（3）分析與討論：

①實驗用的癌細胞細胞株可以通過克隆培養(yǎng)法建立。獲取癌細胞時需用胰蛋白酶（胰酶處理癌細胞株，將癌細胞轉(zhuǎn)入含內(nèi)皮細胞的培養(yǎng)瓶后所進行的培養(yǎng)稱為傳代培養(yǎng)。

②導(dǎo)致癌細胞從母瘤分離脫落的原因可能是癌細胞膜表面粘連蛋白（糖蛋白）減少。根據(jù)實驗可推測：物質(zhì)X可能是通過減少腫瘤細胞與毛細血管內(nèi)皮細胞的粘附率，來達到抑制癌細胞轉(zhuǎn)移的作用。