Question

羊絨素有“軟黃金”之稱，內(nèi)蒙古絨山羊和遼寧絨山羊是我國的兩大產(chǎn)絨品種．我國生物學(xué)家運(yùn)用現(xiàn)代生物技術(shù)培育出了轉(zhuǎn)基因絨山羊．其過程如圖1所示：

（1）在遼寧絨山羊細(xì)胞中獲取的IGF 一I基因在導(dǎo)入胚胎干細(xì)胞之前須

 

，這是基因工程操作的核心步驟，若該過程使用的質(zhì)粒是雙鏈閉合環(huán)狀的DNA分子，用兩種識別序列不同的限制酶M和N切割（識別序列和切割位點(diǎn)如圖2），通過凝電泳分離分析得下表．

使用限制酶	酶切結(jié)果（單位：Kb）
酶M	1.0、5.0、10.0
酶M+酶N	1.0、2.0、3.0、4.0、5.0

（2）①在該質(zhì)粒中，N酶的切割位點(diǎn)有

 

個．
 ②M酶與N酶切出的能相互粘連的末端在酶的作用下相互連接，連接后的序列是否能用M酶、N酶進(jìn)行切割？

 

（填“能”或“不能”）．
（3）胚胎干細(xì)胞（ES）可由囊胚的

 

有分離培養(yǎng)獲得．轉(zhuǎn)基因胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)過程中應(yīng)定期

 

，防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物對細(xì)胞自身造成危害．
（4）干細(xì)胞經(jīng)擴(kuò)大培養(yǎng)誘導(dǎo)分化為早期胚胎，隨后即可植人經(jīng)

 

處理的代孕母羊體內(nèi)．

Answer 1

考點(diǎn)：基因工程的原理及技術(shù),動物胚胎發(fā)育的過程

專題：

分析：根據(jù)題意和圖示分析可知：質(zhì)粒是環(huán)狀DNA分子，酶M將質(zhì)粒切割成三個DNA分子片段，所以酶M的切割位點(diǎn)有3個．酶M和酶N共切割成5個片段，所以酶N的切割位點(diǎn)是2個．由圖2可知，酶M和酶N切割后的形成的黏性末端相同，故兩者的末端可相互連接．

解答： 解：（1）基因工程的核心步驟是基因表達(dá)載體的構(gòu)建．
（2）①由分析可知，M酶的切割位點(diǎn)是3個，N酶的切割位點(diǎn)是2個．
②由圖可知，M酶與N酶切出的能相互粘連的末端在酶的作用下相互連接形成或，連接后的堿基序列與酶M或酶N的切割位點(diǎn)都不相同，故不能M酶或N酶切割．
（3）胚胎干細(xì)胞可由囊胚的內(nèi)細(xì)胞團(tuán)分離培養(yǎng)獲得．配制的培養(yǎng)液要滿足營養(yǎng)、適宜的溫度、PH、滲透壓等條件．因此，轉(zhuǎn)基因胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)過程中應(yīng)定期更換培養(yǎng)液，防止細(xì)胞代謝產(chǎn)物對細(xì)胞自身造成危害．
（4）胚胎移植過程需要對代孕母羊做同期發(fā)情處理．
故答案為：
（1）構(gòu)建基因表達(dá)載體（構(gòu)建重組DNA分子）
（2）2   不能
（3）內(nèi)細(xì)胞團(tuán) 更換培養(yǎng)液 　
（4）同期發(fā)情

點(diǎn)評：本題考查胚胎工程相關(guān)知識，能從課外材料中獲取相關(guān)的生物學(xué)信息，并能運(yùn)用這些信息，結(jié)合所學(xué)知識解決相關(guān)的生物學(xué)問題．