Question

【題目】自養(yǎng)需氧型的硝化細(xì)菌能夠降低水體中的銨鹽，對(duì)水體有一定的凈化作用，請(qǐng)回答：

（1）培養(yǎng)硝化細(xì)菌時(shí)，將含固體培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿倒置的目的是_________。培養(yǎng)基中加入銨鹽為硝化細(xì)菌的生長(zhǎng)提供_________，培養(yǎng)基中沒有加入有機(jī)碳，從功能上看這種培養(yǎng)基屬于_________培養(yǎng)基。

（2）硝化細(xì)菌純化并計(jì)數(shù)時(shí)，對(duì)照組應(yīng)該涂布等量的_________。樣液稀釋103倍后，取0.1mL涂布到四個(gè)平板，統(tǒng)計(jì)其菌落數(shù)分別為251、265、276、348個(gè)，可推測(cè)原樣液中硝化細(xì)菌的濃度為_________個(gè)/mL，該方法測(cè)定的硝化細(xì)菌的含量和實(shí)際值相比，一般_________（填“偏大”或“偏小”）。

（3）若要探究弱酸弱堿條件下硝化細(xì)菌對(duì)銨鹽轉(zhuǎn)化能力的大小，現(xiàn)提供足量含某銨鹽的液體培養(yǎng)基及PH值分別為5、9的弱酸和弱堿緩沖液，寫出你的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)思路：

____________________________________。

Answer 1

【答案】 防止冷凝形成水滴污染培養(yǎng)基（或防止培養(yǎng)基表面的水分過快揮發(fā)） 氮源（或氮源和能量） 選擇 無菌水 2.64×106 偏小 將含胺鹽的液體培養(yǎng)基均分成三等份，分別加入等量的弱酸、弱堿緩沖液和無菌水（作為對(duì)照）使其PH值依次調(diào)節(jié)為5、9、7，培養(yǎng)相同時(shí)間后，測(cè)定培養(yǎng)基中的胺鹽的剩余量來判斷硝化細(xì)菌對(duì)銨鹽轉(zhuǎn)換能力的大小

【解析】試題分析：本題考查了微生物的分離與培養(yǎng)的有關(guān)知識(shí)，解題關(guān)鍵是能夠掌握無菌技術(shù)的主要內(nèi)容，掌握選擇培養(yǎng)基的選擇作用，并具有一定的實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)能力，再結(jié)合題意，就能準(zhǔn)確作答。

（1）微生物培養(yǎng)中將含有固體培養(yǎng)基的培養(yǎng)皿倒置的目的是防止冷凝形成水滴污染培養(yǎng)基。硝化細(xì)菌能夠利用銨鹽的氧化釋放的能量合成自身的有機(jī)物，同時(shí)也可以為硝化細(xì)菌提供氮源．硝化細(xì)菌屬于自養(yǎng)微生物，培養(yǎng)基中不需要進(jìn)入碳源，從功能上看這種培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基。

（2）硝化細(xì)菌純化并計(jì)數(shù)時(shí)，對(duì)照組應(yīng)該涂布等量的無菌水。菌落數(shù)大于300的不能用于計(jì)數(shù)，因此剩下三個(gè)可以用來計(jì)數(shù)，可推測(cè)硝化細(xì)菌的濃度為（251+265+276）/3×10×106=2.64×109個(gè)/mL。稀釋涂布平板法測(cè)定活菌數(shù)目時(shí)，由于相鄰的細(xì)菌可能形成一個(gè)菌落，因此測(cè)定值可能比實(shí)際值小。

（3）探究弱酸弱堿條件下硝化細(xì)菌對(duì)銨鹽轉(zhuǎn)化能力的大小屬于中，需要設(shè)置酸性、中性、堿性三組進(jìn)行相互對(duì)照，所以取含銨鹽的液體培養(yǎng)基均分成3等分，其PH值可依次調(diào)節(jié)為5、7、9，培養(yǎng)相同的時(shí)間后，可通過測(cè)定培養(yǎng)基中的銨鹽的剩余量來判斷硝化細(xì)菌分解能力的大小。