Question

【題目】某同學在做微生物實驗時，不小心把圓褐固氮菌和酵母菌混在一起。該同學設計下面的實驗，分離得到純度較高的圓褐固氮菌和酵母菌。

（1）實驗原理：圓褐固氮菌是自生固氮菌，能在無氮培養(yǎng)條件下生長繁殖而酵母菌則不能；青霉素不影響酵母菌等真菌的生長繁殖，而會抑制圓褐固氮菌的生長繁殖。

（2）材料用具：（略）

（3）實驗步驟

①制備兩種培養(yǎng)基，將兩種培養(yǎng)基各自分成兩份，依次標號A、a和B、b。

②____________________________________，并在25℃條件下培養(yǎng)_____天。

③分別從A、B培養(yǎng)基的菌落中挑取生長良好的菌并分別接種到a、b培養(yǎng)基中，適宜條件下培養(yǎng)3～4天。

（4）請問答

①對新配制的培養(yǎng)基滅菌時所用的設備是_________________。

②本實驗中，配制的分離用的培養(yǎng)基成分特點：A、a是_____培養(yǎng)基，B、b是_______培養(yǎng)基，根據(jù)上述原理配制的培養(yǎng)基屬于_____培養(yǎng)基。

③根據(jù)所需目的配制上述培養(yǎng)基時除營養(yǎng)要協(xié)調(diào)外還應注意_________。

④實驗步驟中第③步的目的是___________。

⑤圓褐固氮菌與酵母菌在結(jié)構(gòu)上的主要差異為______________。

⑥青霉素抑制圓褐固氮菌等細菌的生長繁殖，其作用機理是破壞或抑制其細胞壁的形成。請據(jù)此推測不影響酵母菌等真菌生長繁殖的原因是______________。

Answer 1

【答案】分別在A、B培養(yǎng)基上接種等量的混合的微生物 3～4 高壓蒸汽滅菌鍋 無氮 含青霉素的 選擇 pH要適宜 分離得到純度較高的圓褐固氮菌和酵母菌 圓褐固氮菌無成形的細胞核 細菌細胞壁和真菌細胞壁的化學組成不同

【解析】

微生物分離的基本步驟為配制培養(yǎng)基、接種、培養(yǎng)篩選等。培養(yǎng)基，是指供給微生物、植物或動物（或組織）生長繁殖的，由不同營養(yǎng)物質(zhì)組合配制而成的營養(yǎng)基質(zhì)。一般都含有碳水化合物、含氮物質(zhì)、無機鹽（包括微量元素）、維生素和水等幾大類物質(zhì)。培養(yǎng)基既是提供細胞營養(yǎng)和促使細胞增殖的基礎物質(zhì)，也是細胞生長和繁殖的生存環(huán)境。培養(yǎng)基種類很多，根據(jù)培養(yǎng)功能可分為基礎培養(yǎng)基、選擇培養(yǎng)基、加富培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基等；根據(jù)使用范圍可分為細菌培養(yǎng)基、放線菌培養(yǎng)基、酵母菌培養(yǎng)基、真菌培養(yǎng)基等。培養(yǎng)基配成后一般需測試并調(diào)節(jié)pH，還需進行滅菌，通常有高溫滅菌和過濾滅菌。培養(yǎng)基由于富含營養(yǎng)物質(zhì)，易被污染或變質(zhì)。選擇培養(yǎng)基是指一類根據(jù)特定微生物的特殊營養(yǎng)要求或其對某理化因素抗性的原理而設計的培養(yǎng)基。具有只允許特定的微生物生長，而同時抑制或阻止其他微生物生長的功能。

（3）②培養(yǎng)基配制好以后需要將菌種接種在上面培養(yǎng)。一般培養(yǎng)3～4天可以看到菌落。

（4）①用高壓蒸汽滅菌鍋對新配制的培養(yǎng)基進行高壓蒸汽滅菌。

②圓褐固氮菌能在無氮培養(yǎng)條件下生長繁殖而酵母菌則不能；青霉素不影響酵母菌等真菌的生長繁殖，而會抑制圓褐固氮菌的生長繁殖。故一個培養(yǎng)基中不含氮（圓褐固氮菌生長），一個培養(yǎng)基中含青霉素（酵母菌生長）。這兩類培養(yǎng)基都屬于選擇培養(yǎng)基。

③培養(yǎng)基的pH要適宜。

④實驗步驟中第③步轉(zhuǎn)到新的培養(yǎng)基上培養(yǎng)，目的是分離得到純度較高的圓褐固氮菌和酵母菌。

⑤圓褐固氮菌（細菌）與酵母菌（真菌）在結(jié)構(gòu)上的主要差異為圓褐固氮菌無成形的細胞核。

⑥細菌細胞壁的成分主要是肽聚糖，真菌細胞壁的成分主要是殼多糖。