Question

【題目】垃圾分類、文明環(huán)保。某研究團(tuán)隊擬從餐廚垃圾中分離具有高效降解淀粉能力的微生物，并制成菌制劑用于餐廚垃圾高效無害化處理。對所取餐時垃圾浸泡液進(jìn)行產(chǎn)淀粉酶細(xì)菌的分離操作（A組）和計數(shù)操作（B組），過程如圖。請回答下列回題：

（1）步驟④，⑤所用培養(yǎng)基的成分，最大的區(qū)別是固體培養(yǎng)基中添加了______________，步驟③、④所用培養(yǎng)基的成分，最大的區(qū)別是______________種類不同，步驟⑤、⑧接種時需設(shè)置未接種培養(yǎng)基做對照，目的是______________________________________________________________________。

（2）步驟⑧的接種方法是____________________________。取1 mL菌液稀釋1000倍，分別將0．1 mL的菌液涂布在4個平板上。經(jīng)培養(yǎng)后4個平板的菌落數(shù)分別是58、60、56和28，則發(fā)酵液中釀酒酵母的數(shù)量為______________個/mL。該統(tǒng)計結(jié)果往往低于實(shí)際活菌值，原因是______________________。

（3）從細(xì)菌體內(nèi)提取出來的淀粉酶首先要檢測______________，以便更好地將酶用于生產(chǎn)，還可采用固定化酶技術(shù)中的______________方法使酶能反復(fù)利用。

Answer 1

【答案】瓊脂 碳源 檢測培養(yǎng)基是否被污染 稀釋涂布平板法 5．8×105 當(dāng)兩個或多個菌連在一起時平板上觀察到的是一個菌落 酶的活性（活力） 物理吸附或化學(xué)結(jié)合

【解析】

檢測土壤中細(xì)菌總數(shù)，題圖所示采用的計數(shù)方法是稀釋涂布平板法進(jìn)行計數(shù)；用稀釋涂布平板法測定同一土壤樣品中的細(xì)菌數(shù)時，在每一個梯度濃度內(nèi)，至少要涂布3個平板，選擇菌落數(shù)在30～300的進(jìn)行記數(shù)，求其平均值，再通過計算得出土壤中細(xì)菌總數(shù)。

（1）步驟④中為液體培養(yǎng)基，步驟⑤為接種在固體培養(yǎng)基培養(yǎng)，兩者最大的區(qū)別是固體培養(yǎng)基中添加了瓊脂；步驟③為擴(kuò)大培養(yǎng)，而步驟④為選擇培養(yǎng)基，選擇培養(yǎng)使用的培養(yǎng)基為選擇培養(yǎng)基，因此所用的培養(yǎng)基的成分，最大的區(qū)別是碳源種類不同，即選擇培養(yǎng)基中需要以淀粉作為唯一碳源；為檢測培養(yǎng)基是否被污染，步驟⑤、⑧接種時需設(shè)置未接種培養(yǎng)基做對照，通過比較空白培養(yǎng)基與接種培養(yǎng)基的菌落數(shù)目檢測污染情況。

（2）圖中步驟⑧接種后需要計數(shù)，故接種方法為稀釋涂布平板法；應(yīng)選擇均數(shù)在30300之間的菌落進(jìn)行計數(shù)，故發(fā)酵液中釀酒酵母的數(shù)量為（58＋60＋56）/3÷0.1×1000=5．8×105個/mL；因為當(dāng)兩個或多個菌連在一起時，平板上觀察到的是一個菌落，故用稀釋涂布平板法統(tǒng)計結(jié)果往往低于實(shí)際活菌值。

（3）從細(xì)菌體內(nèi)提取出來的淀粉酶首先要檢測酶的活性（活力），以便更好地將酶用于生產(chǎn)；固定化酶的方法主要有化學(xué)結(jié)合法和物理吸附法。