Question

【題目】某研究小組從牛的瘤胃中采集樣本，進(jìn)行分解尿素的微生物的分離與計(jì)數(shù)。實(shí)驗(yàn)基本步驟如下：

（1）分解尿素的微生物含有_______________，因此，配制培養(yǎng)基時(shí)以尿素作為唯一氮源，尿素會(huì)被分解成_________使培養(yǎng)基的堿性增強(qiáng)。

（2）配制培養(yǎng)基時(shí)，需添加瓊脂，瓊脂起________________作用；培養(yǎng)基中添加___________作為指示劑，可使目標(biāo)菌落的周圍產(chǎn)生紅色環(huán)帶。

（3）對(duì)尿素溶液進(jìn)行滅菌的最適方法是___________滅菌。

A.高壓蒸汽 B.干熱 C.添加抗生素 D.過(guò)濾 E.紫外線照射 F.70﹪酒精浸泡

（4）該小組在接種前，隨機(jī)取若干滅菌后的空白平板先行培養(yǎng)了一段時(shí)間，這樣做的目的是__________________________；然后將1mL瘤胃樣液稀釋1000倍，在3個(gè)平板上用涂布法分別接入0.1mL稀釋液；經(jīng)適當(dāng)培養(yǎng)后，3個(gè)平板的菌落數(shù)分別為49、47和45。據(jù)此可得出每升瘤胃樣液中分解尿素的微生物活菌數(shù)為__________，理論上，統(tǒng)計(jì)的菌落數(shù)往往_____（低、等、高）于接種的實(shí)際活菌數(shù)目。

Answer 1

【答案】 脲酶（分解尿素的酶） 氨（NH3） 凝固劑 酚紅 D 檢測(cè)培養(yǎng)基平板滅菌是否合格 4.7×108 低

【解析】（1）分解尿素的微生物含有分解尿素的酶，將尿素分解成氨，所以分離能分解尿素的細(xì)菌時(shí)，要以尿素作為選擇培養(yǎng)基的唯一氮源。

（2）在配置微生物培養(yǎng)的固體培養(yǎng)基時(shí)需要加入瓊脂作為凝固劑；培養(yǎng)基中添加酚紅作為指示劑，可使目標(biāo)菌落的周圍產(chǎn)生紅色環(huán)帶。

（3）由于尿素在高溫下會(huì)分解，所以對(duì)尿素溶液的滅菌要采用G6玻璃漏斗過(guò)濾的方法。

（4）微生物培養(yǎng)過(guò)程應(yīng)該進(jìn)行無(wú)菌操作，配制的培養(yǎng)基要進(jìn)行高壓蒸汽滅菌，可以將滅菌后的空白平板進(jìn)行培養(yǎng)以檢測(cè)培養(yǎng)基滅菌是否徹底；由題意知1ml瘤胃樣液中的菌落數(shù)是（49+47+45）÷3÷0.1×1000=4.7×105個(gè)，所以每升瘤胃樣液中的活菌數(shù)為4.7×105×103=4.7×108。有些活菌在培養(yǎng)過(guò)程中死亡,另外有些菌落是有多個(gè)活菌共同形成的,所以按形成的菌落數(shù)目來(lái)計(jì)算活菌數(shù)目的話,結(jié)果往往會(huì)少于活菌實(shí)際數(shù)目。