Question

6．飼養(yǎng)動物常用的植物飼料中含有難溶的植酸鈣等物質(zhì)，很難被動物吸收利用，還影響對其他營養(yǎng)物質(zhì)的利用?若在飼料中添加植酸酶，則能催化其水解成為可以吸收利用的磷酸鹽等?以下是科研人員從作物根部土壤中分離產(chǎn)植酸酶的菌株的過程示意圖?請分析作答?

（1）培養(yǎng)基中除了添加植酸鈣以外，應(yīng)含有碳源、氮源、水、無機(jī)鹽等基本營養(yǎng)物質(zhì)?
（2）為防止雜菌污染，要對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿等進(jìn)行滅菌?接種后須將培養(yǎng)皿呈倒置狀態(tài)放置?
（3）接種以前要進(jìn)行的一系列操作，目的是在固體培養(yǎng)基表面形成單個(gè)菌落?根據(jù)土壤樣品的稀釋倍數(shù)和接種稀釋液的體積，統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)就能大致推測出樣品中的活菌數(shù)?通常每種稀釋液需涂布3個(gè)平板，取其平均值?若將最后一個(gè)試管中的菌液每次吸取0.1mL涂布培養(yǎng)后獲得平均值是C，則1g土壤中含有此菌的菌株數(shù)是C×10⁶?
（4）若要對上述菌株進(jìn)行純化，通常使用的劃線工具是接種環(huán)；接種時(shí)，在第一區(qū)域劃線后須將該工具灼燒、冷卻后再劃線，在第二次劃線時(shí)須從第一次劃線的末端開始，這樣做的目的是從上一區(qū)域獲得菌種．
（5）產(chǎn)植酸酶的菌株會水解植酸鈣，菌落的周圍將形成透明的區(qū)域，根據(jù)透明區(qū)域的有無，可初步判斷該菌是否產(chǎn)植酸酶?實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示A～E五種菌株中，E是產(chǎn)植酸酶最理想的菌株?

Answer 1

分析 稀釋平板法在培養(yǎng)基上分離、培養(yǎng)出微生物的單個(gè)菌落，以便于計(jì)數(shù)、移植、分離，從而達(dá)到純培養(yǎng)的目的．選擇培養(yǎng)基是在培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì)，以抑制不需要的微生物的生長，促進(jìn)所需要的微生物的生長．由于植酸鈣的不溶解性，使培養(yǎng)基中形成白色渾濁．產(chǎn)植酸酶的菌株會水解植酸鈣，菌落的周圍將形成透明的區(qū)域，根據(jù)透明區(qū)域的有無，可初步判斷該菌是否產(chǎn)植酸酶．在微生物實(shí)驗(yàn)操作中，防止雜菌污染時(shí)貫穿實(shí)驗(yàn)整個(gè)過程中．計(jì)算菌種數(shù)時(shí)，關(guān)注稀釋的倍數(shù)．

解答 解：（1）從作物根部土壤中分離產(chǎn)植酸酶的菌株需要使用含植酸鈣的選擇培養(yǎng)基，培養(yǎng)基中應(yīng)含有碳源、氮源、水、無機(jī)鹽等基本營養(yǎng)物質(zhì)?
（2）為防止雜菌污染，要對培養(yǎng)基和培養(yǎng)皿等進(jìn)行滅菌處理，接種后需要將培養(yǎng)皿倒置培養(yǎng)．
（3）接種以前要進(jìn)行的一系列操作，即稀釋平板法培養(yǎng)出微生物的單個(gè)菌落，達(dá)到純培養(yǎng)的目的．稀釋涂布平板法進(jìn)行微生物的計(jì)數(shù)突觸需要至少3個(gè)平板統(tǒng)計(jì)平板上的菌落數(shù)取其平均值．最后一個(gè)試管中的菌液每次吸取0.1mL涂布培養(yǎng)后獲得平均值是C則1g土壤中含有活菌數(shù)為C×10×10³×10²═C×10⁶?
（4）題干中的接種過程中用到的接種工具是接種環(huán)．接種時(shí)，在第一區(qū)域劃線后須將接種環(huán)灼燒、冷卻后再劃線．
（5）由于植酸鈣的不溶解性，使培養(yǎng)基中形成白色渾濁．產(chǎn)植酸酶的菌株會水解植酸鈣，菌落的周圍將形成透明的區(qū)域．根據(jù)透明區(qū)域的有無，可初步判斷該菌是否產(chǎn)植酸酶．故圖中E是產(chǎn)植酸酶最理想的菌株?
故答案為：
（1）植酸鈣
（2）滅菌    倒置
（3）單個(gè)菌落  菌落數(shù)  3  C×10⁶
（4）接種環(huán)   灼燒、冷卻
（5）E

點(diǎn)評 本題綜合微生物的培養(yǎng)及實(shí)驗(yàn)設(shè)計(jì)和分析能力，意在考查考生能理解所學(xué)知識的要點(diǎn)，把握知識間的內(nèi)在聯(lián)系的能力；能運(yùn)用所學(xué)知識與觀點(diǎn)，對實(shí)驗(yàn)現(xiàn)象和結(jié)果進(jìn)行解釋、分析、處理．