Question

【題目】如圖為某種質粒表達載體簡圖，小箭頭所指分別為限制性內切酶EcoRⅠ、Bam HⅠ的酶切位點，ampR為青霉素抗性基因，tetR為四環(huán)素抗性基因，P為啟動子，T為終止子，ori為復制原點。已知目的基因的兩端分別有包括EcoRⅠ、Bam HⅠ在內的多種酶的酶切位點。據圖回答：
（1）將含有目的基因的DNA與質粒表達載體分別用EcoRI酶切，酶切產物用DNA連接酶進行連接后，其中由兩個DNA片段之間連接形成的產物有、、三種。
（2）用上述3種連接產物與無任何抗藥性的原核宿主細胞進行轉化實驗。之后將這些宿主細胞接種到含四環(huán)素的培養(yǎng)基中，能生長的原核宿主細胞所含有的連接產物是；若接種到含青霉素的培養(yǎng)基中，能生長的原核宿主細胞所含有的連接產物是。

Answer 1

【答案】
（1）目的基因—載體連接物；載體—載體連接物；目的基因—目的基因連接物
（2）載體—載體連接物；目的基因—載體連接物、載體—載體連接物
【解析】（1）用EcoRI酶切出的目的基因和質粒具有相同的黏性末端，如果放在一起加入DNA連接酶，則可出現(xiàn)三種連接結果，即會出現(xiàn)目的基因自身形成的連接物，載體自身形成的連接物和重組質粒。（2）載體自身形成的連接物能重新形成完整的tetR基因，具有抗四環(huán)素的特點，其他連接物中tetR基因被限制性內切酶破壞，不再具有抗四環(huán)素的特點；在整個操作過程中，ampR基因保持完整，質粒自身形成的連接物和重組質粒都具有抗青霉素的特性。
【考點精析】根據題目的已知條件，利用基因工程的原理及技術的相關知識可以得到問題的答案，需要掌握基因工程的原理是利用DNA重組技術．