家蠶細(xì)胞具有高效表達(dá)外源基因的能力。將人干擾素基因?qū)爰倚Q細(xì)胞并大規(guī)模培養(yǎng),可提取干擾素用于制藥。
(1)進(jìn)行轉(zhuǎn)基因操作前,需用 酶短時(shí)處理幼蠶組織,以便獲得單個(gè)細(xì)胞。
(2)為使干擾素基因在家蠶細(xì)胞中高效表達(dá),需要把來(lái)自cDNA文庫(kù)的干擾素基因片段正確插入表達(dá)載體的 和 之間。
(3)采用PCR技術(shù)可驗(yàn)證干擾素基因是否已經(jīng)導(dǎo)入家蠶細(xì)胞。該P(yáng)CR反應(yīng)體系的主要成分應(yīng)包含:擴(kuò)增緩沖液(含Mg2+)、水、4種脫氧核糖核苷酸、模板DNA、 和 。
(4)利用生物反應(yīng)器培養(yǎng)家蠶細(xì)胞時(shí),貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞會(huì)產(chǎn)生接觸抑制。通常將多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反應(yīng)器中,這樣可以 ,增加培養(yǎng)的細(xì)胞數(shù)量,也有利于空氣交換。
答案:(1)胰蛋白(或膠原蛋白) (2)啟動(dòng)子 終止子 (3)對(duì)干擾素基因特異的DNA引物對(duì) Taq DNA聚合酶 (4)擴(kuò)大細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)的附著面積
解析:(1)動(dòng)物細(xì)胞間存在蛋白質(zhì),所以要用胰蛋白酶處理幼蠶組織,以獲得單細(xì)胞。
(2)目的基因應(yīng)插入表達(dá)載體的啟動(dòng)子和終止子之間。
(3)PCR擴(kuò)增技術(shù)所需條件除擴(kuò)增緩沖液、水、脫氧核苷酸、模板DNA除外,還需要DNA引物和熱穩(wěn)定DNA聚合酶。
(4)細(xì)胞有貼壁生長(zhǎng)現(xiàn)象,增殖到一定程度會(huì)相互接觸抑制生長(zhǎng),所以在生物反應(yīng)器中放入多孔的中空薄壁玻璃珠,可以增大細(xì)胞貼壁面積,有利于細(xì)胞增殖,也有利于空氣交換。
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科目:高中生物 來(lái)源:2011-2012學(xué)年遼寧省盤錦市二中高二下學(xué)期期初考試生物試卷(帶解析) 題型:綜合題
(14分)回答有關(guān)生物工程的問(wèn)題:
(1)構(gòu)建基因工程表達(dá)載體時(shí),用不同類型的限制酶切割DNA后,可能產(chǎn)生粘性末端,也可能產(chǎn)生__末端。若要在限制酶切割目的基因和質(zhì)粒后使其直接進(jìn)行連接,則應(yīng)選擇能使二者產(chǎn)生_(相同不同)粘性末端的限制酶。
(2)利用大腸桿菌生產(chǎn)人胰島素時(shí),構(gòu)建的表達(dá)載體含有人胰島素基因及其啟動(dòng)子等,其中啟動(dòng)子的作用是提供________特異性識(shí)別結(jié)合位點(diǎn),驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄。在用表達(dá)載體轉(zhuǎn)化大腸桿菌時(shí),常用___處理大腸桿菌,以利于表達(dá)載體進(jìn)入:為了檢測(cè)胰島素基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA,可用標(biāo)記的胰島素基因片段作探針與__________雜交,該雜交技術(shù)稱為_________。
(3)如果要將某目的基因通過(guò)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法導(dǎo)入植物細(xì)胞,先要將目的基因插入農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒的______中,然后用該農(nóng)桿菌感染植物細(xì)胞,通過(guò)DNA重組將_____插入植物細(xì)胞的染色體___上。
(4)家蠶細(xì)胞具有高效表達(dá)外源基因能力。將人干擾素基因?qū)爰倚Q細(xì)胞并大規(guī)模培養(yǎng),可以提取干擾素用于制藥。為使干擾素基因在家蠶細(xì)胞中高效表達(dá),需要把來(lái)自cDNA文庫(kù)的干擾素基因片段正確插入表達(dá)載體的_________和___________之間。
(5)采用PCR技術(shù)可驗(yàn)證干擾素基因是否已經(jīng)導(dǎo)入家蠶細(xì)胞。改PCR反應(yīng)體系的主要成分應(yīng)該包含:擴(kuò)增緩沖液(含Mg2+)、水,4種脫氧核糖苷酸、模板DNA、_____________和_________________。
(6)利用生物反應(yīng)器培養(yǎng)家蠶細(xì)胞時(shí),細(xì)胞會(huì)產(chǎn)生接觸抑制。通常將多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反應(yīng)器中,這樣可以_________________增加培養(yǎng)的細(xì)胞數(shù)量,也有利于空氣交換。
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科目:高中生物 來(lái)源:2010—2011學(xué)年山東省鄒城一中高二下學(xué)期期末考試生物試卷 題型:綜合題
Ⅰ、家蠶細(xì)胞具有高效表達(dá)外源基因能力。將人干擾素基因?qū)爰倚Q細(xì)胞并大
規(guī)模培養(yǎng),可以提取干擾素用于制藥。
(1)進(jìn)行轉(zhuǎn)基因操作前,需用___________酶短時(shí)處理幼蠶組織,以便獲得單個(gè)細(xì)胞。
(2)為使干擾素基因在家蠶細(xì)胞中高效表達(dá),需要把來(lái)自cDNA文庫(kù)的干擾素基因片段正確插入表達(dá)載體的_________和___________之間。
Ⅱ、動(dòng)物乳腺生物反應(yīng)器已成為生物技術(shù)領(lǐng)域發(fā)展的尖端方向,具有廣闊的開發(fā)前景。
十多年來(lái),已有數(shù)十種人體蛋白在動(dòng)物乳汁中生產(chǎn)出來(lái),在小鼠乳腺中獲得表達(dá)的產(chǎn)品更是多達(dá)數(shù)百種
(1)在獲得人的蛋白基因后,可通過(guò) 技術(shù)在短時(shí)間內(nèi)得到大量的這種基因
(2)將人的蛋白基因?qū)胄∈蟮氖荏w細(xì)胞,常用方法是 。
(3)進(jìn)行基因轉(zhuǎn)移時(shí),通常要將外源基因轉(zhuǎn)入 中,并通常采用 技術(shù)檢測(cè)外源基因是否插入了小鼠的基因組。
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科目:高中生物 來(lái)源:2013屆海南省瓊海市嘉積中學(xué)高三上學(xué)期教學(xué)質(zhì)量監(jiān)測(cè)(四)生物試卷(帶解析) 題型:綜合題
【生物——選修3:現(xiàn)代生物科技專題】(15分) 。
(1)對(duì)于基因工程來(lái)說(shuō),其核心是 ;將目的基因?qū)雱?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是 。
(2)植物體細(xì)胞雜交過(guò)程有兩個(gè)關(guān)鍵,一個(gè)是在把植物細(xì)胞雜交之前,必須
;另外一個(gè)是 。
(3)在進(jìn)行單克隆抗體的生產(chǎn)過(guò)程中,要把兩種細(xì)胞進(jìn)行融合,一種是在體外能夠大量增殖的骨髓瘤細(xì)胞,另外一種是 ;誘導(dǎo)該兩種細(xì)胞融合常用的因素有PEG、電激、 等。
(4)胚胎干細(xì)胞在功能上具有發(fā)育的 性,在體外培養(yǎng)的條件下,可以增殖而不發(fā)生 。
(5)家蠶細(xì)胞具有高效表達(dá)外源基因能力。將人干擾素基因?qū)爰倚Q細(xì)胞并大規(guī)模培養(yǎng),可以提取干擾素用于制藥。
①進(jìn)行轉(zhuǎn)基因操作前,需用___________酶短時(shí)處理幼蠶組織,以便獲得單個(gè)細(xì)胞。
②為使干擾素基因在家蠶細(xì)胞中高效表達(dá),需要把來(lái)自cDNA文庫(kù)的干擾素基因片段正確插入表達(dá)載體的_________和___________之間。
③采用PCR技術(shù)可驗(yàn)證干擾素基因是否已經(jīng)導(dǎo)入家蠶細(xì)胞。PCR反應(yīng)體系的主要成分應(yīng)該包含:擴(kuò)增緩沖液(含Mg2+)、水、4種脫氧核糖苷酸、模板DNA、_____________和_________________;在PCR反應(yīng)過(guò)程中,有一個(gè)環(huán)節(jié)是從較高的溫度冷卻到相對(duì)較低的55℃左右,其作用是 。
利用生物反應(yīng)器培養(yǎng)家蠶細(xì)胞時(shí),貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞會(huì)產(chǎn)生接觸抑制。通常將多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反應(yīng)器中,這樣可以_________________增加培養(yǎng)的細(xì)胞數(shù)量,也有利于空氣交換。
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科目:高中生物 來(lái)源:2013-2014學(xué)年甘肅省高三9月月考生物試卷(解析版) 題型:綜合題
家蠶細(xì)胞具有高效表達(dá)外源基因的能力。將人干擾素基因?qū)爰倚Q細(xì)胞并大規(guī)模培
養(yǎng),可提取干擾素用于制藥。
(1)進(jìn)行轉(zhuǎn)基因操作前,需用________________酶短時(shí)處理幼蠶組織,以便獲得單個(gè)細(xì)胞。
(2)為使干擾素基因在家蠶細(xì)胞中高效表達(dá),需要把來(lái)自cDNA文庫(kù)的干擾素基因片段正確插入表達(dá)載體的________和________之間。
(3)采用PCR技術(shù)可驗(yàn)證干擾素基因是否已經(jīng)導(dǎo)入家蠶細(xì)胞。該P(yáng)CR反應(yīng)體系的主要成分應(yīng)包含:擴(kuò)增緩沖液(含Mg2+)、水、4種脫氧核糖核苷酸、模板DNA、________和________。
(4)利用生物反應(yīng)器培養(yǎng)家蠶細(xì)胞時(shí),貼壁生長(zhǎng)的細(xì)胞會(huì)產(chǎn)生接觸抑制。通常將多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反應(yīng)器中,這樣可以________,增加培養(yǎng)的細(xì)胞數(shù)量,也有利于空氣交換。
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科目:高中生物 來(lái)源:2013屆遼寧省盤錦市高二下學(xué)期期初考試生物試卷(解析版) 題型:綜合題
(14分)回答有關(guān)生物工程的問(wèn)題:
(1)構(gòu)建基因工程表達(dá)載體時(shí),用不同類型的限制酶切割DNA后,可能產(chǎn)生粘性末端,也可能產(chǎn)生__末端。若要在限制酶切割目的基因和質(zhì)粒后使其直接進(jìn)行連接,則應(yīng)選擇能使二者產(chǎn)生_(相同不同)粘性末端的限制酶。
(2)利用大腸桿菌生產(chǎn)人胰島素時(shí),構(gòu)建的表達(dá)載體含有人胰島素基因及其啟動(dòng)子等,其中啟動(dòng)子的作用是提供________特異性識(shí)別結(jié)合位點(diǎn),驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄。在用表達(dá)載體轉(zhuǎn)化大腸桿菌時(shí),常用___處理大腸桿菌,以利于表達(dá)載體進(jìn)入:為了檢測(cè)胰島素基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA,可用標(biāo)記的胰島素基因片段作探針與__________雜交,該雜交技術(shù)稱為_________。
(3)如果要將某目的基因通過(guò)農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法導(dǎo)入植物細(xì)胞,先要將目的基因插入農(nóng)桿菌Ti質(zhì)粒的______中,然后用該農(nóng)桿菌感染植物細(xì)胞,通過(guò)DNA重組將_____插入植物細(xì)胞的染色體___上。
(4)家蠶細(xì)胞具有高效表達(dá)外源基因能力。將人干擾素基因?qū)爰倚Q細(xì)胞并大規(guī)模培養(yǎng),可以提取干擾素用于制藥。為使干擾素基因在家蠶細(xì)胞中高效表達(dá),需要把來(lái)自cDNA文庫(kù)的干擾素基因片段正確插入表達(dá)載體的_________和___________之間。
(5)采用PCR技術(shù)可驗(yàn)證干擾素基因是否已經(jīng)導(dǎo)入家蠶細(xì)胞。改PCR反應(yīng)體系的主要成分應(yīng)該包含:擴(kuò)增緩沖液(含Mg2+)、水,4種脫氧核糖苷酸、模板DNA、_____________和_________________。
(6)利用生物反應(yīng)器培養(yǎng)家蠶細(xì)胞時(shí),細(xì)胞會(huì)產(chǎn)生接觸抑制。通常將多孔的中空薄壁小玻璃珠放入反應(yīng)器中,這樣可以_________________增加培養(yǎng)的細(xì)胞數(shù)量,也有利于空氣交換。
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