Question

【生物﹣選修1生物技術(shù)實(shí)踐】

某研究小組設(shè)計(jì)了以下實(shí)驗(yàn)探究土壤中微生物對(duì)尿素是否有分解作用，并成功篩選到能高效降解尿素的細(xì)菌（目的菌）．實(shí)驗(yàn)步驟如圖所示，培養(yǎng)基成分如表所示．請(qǐng)分析回答問(wèn)題：

KH2PO4 1.4g

Na2HPO4 2.1g

MgSO4?7H2O 0.2g

葡萄糖 10.0g

尿素 1.0g

瓊脂 15.0g

將上述物質(zhì)溶解后，用蒸餾水定容到1000mL

（1）培養(yǎng)基中加入尿素的目的是篩選 目的菌 ，這種培養(yǎng)基屬于 選擇 培養(yǎng)基．

（2）“目的菌”生長(zhǎng)所需的氮源和碳源分別來(lái)自培養(yǎng)基中的 尿素 和 葡萄糖 ，實(shí)驗(yàn)需要振蕩培養(yǎng)，原因是 為目的菌提供氧氣 ．

（3）轉(zhuǎn)為固體培養(yǎng)時(shí)，常采用 涂布平板（劃線） 的方法接種，獲得 單菌落 后繼續(xù)篩選．

（4）下列材料或用具中：①培養(yǎng)細(xì)菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿；②玻璃棒、試管、錐形瓶和吸管；③實(shí)驗(yàn)操作者的雙手．需要滅菌的是 ①② ；需要消毒的是 ③ ．（填序號(hào)）

（5）在進(jìn)行分離分解尿素的細(xì)菌的實(shí)驗(yàn)時(shí)，A同學(xué)從培養(yǎng)基上篩選出大約150個(gè)菌落，而其他同學(xué)只選擇出大約50個(gè)菌落．A同學(xué)的實(shí)驗(yàn)結(jié)果產(chǎn)生的原因可能有 ①②③ （填序號(hào)）．

①由于土樣不同 ②由于培養(yǎng)基污染 ③由于操作失誤 ④沒(méi)有設(shè)置對(duì)照

（6）在該實(shí)驗(yàn)中，可以通過(guò)檢測(cè)培養(yǎng)基pH的變化來(lái)判斷尿素是否被分解，所依據(jù)的原理是 微生物產(chǎn)生的脲酶能將尿素分解成氨，氨會(huì)使培養(yǎng)基的pH升高 ．所用方法是在培養(yǎng)基中加入 酚紅指示劑 ，若尿素被分解，則培養(yǎng)基變成紅色．

 

 

Answer 1

（1）目的菌 選擇

（2）尿素 葡萄糖 為目的菌提供氧氣

（3）涂布平板（劃線） 單菌落

（4）①②③

（5）①②③

（6）微生物產(chǎn)生的脲酶能將尿素分解成氨，氨會(huì)使培養(yǎng)基的pH升高 酚紅指示劑

【解析】

試題分析：本題是對(duì)用于微生物培養(yǎng)的培養(yǎng)基的配方及營(yíng)養(yǎng)成分、選擇培養(yǎng)基的選擇作用、常用的接種方法、無(wú)菌操作技術(shù)、對(duì)分解尿素的菌的鑒定等相關(guān)知識(shí)的綜合性考查，回憶微生物培養(yǎng)的培養(yǎng)基的配方和營(yíng)養(yǎng)成分、選擇培養(yǎng)基的選擇作、常用的接種方法的具體操作和目的，無(wú)菌操作技術(shù)、對(duì)分解尿素的菌的鑒然后結(jié)合問(wèn)題進(jìn)行解答．

【解析】
（1）該實(shí)驗(yàn)的目的是篩選到能高效降解尿素的細(xì)菌，因此培養(yǎng)基中加入尿素的目的是能高效降解尿素的細(xì)菌（目的菌），不能分解尿素的細(xì)菌將因缺少氮源無(wú)法生長(zhǎng)繁殖，因此從功能上看，該培養(yǎng)基屬于選擇培養(yǎng)基．

（2）目的菌生長(zhǎng)繁殖需要的氮源來(lái)自尿素，碳源來(lái)自葡萄糖；由于分解尿素的菌是需要微生物，因此需要震蕩培養(yǎng)．

（3）固體培養(yǎng)基上常用的接種方法是稀釋涂布法和平板劃線法；通過(guò)稀釋涂布法或者平板劃線法逐漸稀釋，當(dāng)稀釋度足夠大時(shí)可以獲得由單個(gè)細(xì)胞繁殖而來(lái)的菌落，然后進(jìn)行挑選．

（4）為了保證培養(yǎng)物不被污染，對(duì)培養(yǎng)細(xì)菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿和玻璃棒、試管、錐形瓶和吸管要進(jìn)行滅菌，實(shí)驗(yàn)操作者的雙手要進(jìn)行消毒．

（5）由題意知，該同學(xué)與其他同學(xué)獲得的菌落數(shù)差異很大，可能的原因是采用的土樣不同，培養(yǎng)基滅菌不徹底，培養(yǎng)基被污染；或者是實(shí)驗(yàn)過(guò)程中沒(méi)有進(jìn)行無(wú)菌操作．

（6）尿素被分解尿素的菌氧化成氨氣，氨氣會(huì)使培養(yǎng)基堿性增強(qiáng)，PH升高，指示劑酚紅變紅，因此以通過(guò)在培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，檢測(cè)培養(yǎng)基pH的變化來(lái)判斷尿素是否被分解．