Question

7．土壤農(nóng)桿菌能將自身Ti質(zhì)粒的T-DNA整合到植物染色體DNA上，誘發(fā)植物形成腫瘤．T-DNA中含有植物生長(zhǎng)素合成酶基因（S）和細(xì)胞分裂素合成酶基因（R），如圖1所示，它們的表達(dá)與否能影響相應(yīng)植物激素的含量，進(jìn)而調(diào)節(jié)腫瘤組織的生長(zhǎng)與分化．基因工程常用Ti質(zhì)粒作為運(yùn)載體，圖2表示抗蟲棉培育中使用的三種限制酶A、B、C的識(shí)別序列以及Ti質(zhì)粒上限制酶切割位點(diǎn)的分布，抗蟲基因內(nèi)部不含切割位點(diǎn)，兩側(cè)標(biāo)明序列為切割區(qū)域．

（1）據(jù)圖2分析，切取抗蟲基因時(shí)，使用酶B和酶C限制酶，切割Ti質(zhì)粒時(shí)，使用酶A和酶B限制酶．
（2）成功建構(gòu)的重組質(zhì)粒含有限制酶A的識(shí)別位點(diǎn)0個(gè)，若用酶C處理該重組質(zhì)粒，將得到2個(gè)DNA片段．
（3）若抗蟲基因插入的位置在R基因內(nèi)部，篩選出生根瘤植株即是成功導(dǎo)入抗蟲基因的棉花植株．

Answer 1

分析 分析題圖：在目的基因的左側(cè)只有B酶的識(shí)別位點(diǎn)，右側(cè)只有C酶的識(shí)別位點(diǎn)；質(zhì)粒上含有三種酶的識(shí)別位點(diǎn)，其中T-DNA上含有酶A和酶B的識(shí)別位點(diǎn)，因此應(yīng)選用酶B和酶C切取目的基因，選用酶A和酶B切割Ti質(zhì)粒．

解答 解：（1）在目的基因的左側(cè)只有B酶的識(shí)別位點(diǎn)，右側(cè)只有C酶的識(shí)別位點(diǎn)，因此應(yīng)該使用酶B和酶C切取抗蟲基因，應(yīng)該將目的基因插入T-DNA，而T-DNA中含有A酶和B酶的切割位點(diǎn)，因此應(yīng)該使用酶A和酶B切割Ti質(zhì)粒．
（2）酶A和酶C切割形成的黏性末端相同，使用酶B和酶C切取抗蟲基因，使用酶A和酶B切割Ti質(zhì)粒，再用DNA連接酶連接兩者形成重組質(zhì)粒后，重組質(zhì)粒不含酶A的識(shí)別位點(diǎn)，成功建構(gòu)的重組質(zhì)粒含有兩個(gè)酶C的識(shí)別位點(diǎn)，因此用酶C處理重組質(zhì)粒將得到2個(gè)DNA片段．
（3）若抗蟲基因插入的位置在R基因內(nèi)部，能誘發(fā)植物形成腫瘤，故篩選出生根瘤植株即是成功導(dǎo)入抗蟲基因的棉花植株．
故答案為：
（1）酶B和酶C     酶A和酶B   
（2）0    2 
（3）生根瘤

點(diǎn)評(píng) 本題結(jié)合圖解，考查基因工程的技術(shù)和原理，要求考生識(shí)記基因工程的概念、原理、操作工具及操作步驟，能根據(jù)圖中限制酶的識(shí)別序列及切割位點(diǎn)選擇合適的限制酶，再結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確判斷解答．