Question

13．2008年諾貝爾化學(xué)獎授予了三位在研究綠色熒光蛋白（GFP）方面做出突出貢獻(xiàn)的科學(xué)家．綠色熒光蛋白能在藍(lán)光或紫外光的激發(fā)下發(fā)出熒光，這樣借助 GFP發(fā)出的熒光就可以跟蹤蛋白質(zhì)在細(xì)胞內(nèi)部的移動情況，幫助推斷蛋白質(zhì)的功能．如圖為我國首例綠色熒光蛋白（GFP）轉(zhuǎn)基因克隆豬的培育過程示意圖，據(jù)圖回答：

（1）過程①②中用到的工具酶是限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）、DNA連接酶．
（2）過程③將重組質(zhì)粒導(dǎo)入豬胎兒成纖維細(xì)胞時，采用最多也最有效的方法是顯微注射法．
（3）如果將切取的GFP基因與抑制小豬抗原表達(dá)的基因一起構(gòu)建到載體上，GFP基因可以作為基因表達(dá)載體上的標(biāo)記基因．獲得的轉(zhuǎn)基因克隆豬可以解決的醫(yī)學(xué)難題是可以避免免疫排斥．
（4）基因工程的核心步驟是基因表達(dá)載體的構(gòu)建．重組質(zhì)粒上除含有目的基因外還應(yīng)具備啟動子、終止子、標(biāo)記基因等結(jié)構(gòu)．
（5）基因的載體除圖中的質(zhì)粒外，還有動植物病毒、λ噬菌體的衍生物．
（6）檢測受體細(xì)胞的染色體上是否插入目的基因的方法是DNA分子雜交技術(shù)．
（7）目前科學(xué)家們通過蛋白質(zhì)工程制造出了藍(lán)色熒光蛋白、黃色熒光蛋白等，采用蛋白質(zhì)工程技術(shù)制造出藍(lán)色熒光蛋白過程的正確順序是②①③④（用數(shù)字表示）．
①推測藍(lán)色熒光蛋白的氨基酸序列和基因的核苷酸序列
②藍(lán)色熒光蛋白的功能分析和結(jié)構(gòu)設(shè)計序列
③藍(lán)色熒光蛋白基因的修飾（合成）
④表達(dá)出藍(lán)色熒光蛋白．

Answer 1

分析 分析題圖：圖1為我國首例綠色熒光蛋白（GFP）轉(zhuǎn)基因克隆豬的培育過程示意圖，其中①表示獲取目的基因（綠色．熒光蛋白基因）的過程；②表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程；③表示將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞．此外還采用了核移植、早期胚胎培養(yǎng)、胚胎移植等技術(shù)．

解答 解：（1）①是獲取目的基因的過程，該過程需要用到限制酶；②是基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程，該過程需要用到限制酶和DNA連接酶．中
（2）③將重組質(zhì)粒導(dǎo)入豬胎兒成纖維細(xì)胞時，采用最多也最有效的方法是顯微注射法．
（3）如果將切取的GFP基因與抑制小豬抗原表達(dá)的基因一起構(gòu)建到載體上，GFP基因可以作為基因表達(dá)載體上的標(biāo)記基因．獲得的轉(zhuǎn)基因克隆豬可以解決的醫(yī)學(xué)難題是可以避免免疫排斥．
（4）基因工程的核心步驟是基因表達(dá)載體的構(gòu)建．基因表達(dá)載體的組成包括啟動子、終止子、目的基因和標(biāo)記基因等．
（5）基因工程常用的載體有：質(zhì)粒、動植物病毒、λ噬菌體的衍生物．
（6）檢測受體細(xì)胞的染色體上是否插入目的基因的方法是DNA分子雜交技術(shù)．
（7）蛋白質(zhì)工程的操作過程：預(yù)期蛋白質(zhì)功能→設(shè)計預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu)→推測應(yīng)有氨基酸序列→找到對應(yīng)的脫氧核苷酸序列（基因）→基因表達(dá)合成相應(yīng)的蛋白質(zhì)．因此采用蛋白質(zhì)工程技術(shù)制造出藍(lán)色熒光蛋白過程的正確順序是：②①③④．
故答案為：
（1）限制性核酸內(nèi)切酶（限制酶）、DNA連接酶
（2）顯微注射法
（3）標(biāo)記基因   免疫排斥
（4）基因表達(dá)載體的構(gòu)建    啟動子、終止子、標(biāo)記基因
（5）動植物病毒  λ噬菌體的衍生物
（6）DNA分子雜交技術(shù)   
（7）②①③④

點評 本題結(jié)合我國首例綠色熒光蛋白（GFP）轉(zhuǎn)基因克隆豬的培育過程示意圖，考查基因工程的原理及技術(shù)、核移植技術(shù)及胚胎工程技術(shù)，重點考查基因工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的原理、工具及操作過程，能準(zhǔn)確判斷圖中各步驟的名稱及采用的生物技術(shù)．