Question

16．生物工程是改造生物的結(jié)構(gòu)與功能的手段之一．生物工程的各主要領(lǐng)域并不是各自獨(dú)立的，而是相互聯(lián)系、相互滲透的．它們之間的關(guān)系示意如圖：

（1）基因工程中使用T₄DNA連接酶“縫合”雙鏈DNA片段的平末端末端時(shí)，連接效率比較低．其連接形成的化學(xué)鍵稱為磷酸二脂鍵．
（2）篩選抗癌藥物經(jīng)常要運(yùn)用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)；單克隆抗體的生產(chǎn)過程利用了生物工程中的動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)．
（3）若利用含卡那霉素的培養(yǎng)基篩選已導(dǎo)入抗性基因的受體細(xì)胞，應(yīng)使重組Ti質(zhì)粒中含有抗卡那霉素基因，作為標(biāo)記基因．
（4）將導(dǎo)入目的基因的細(xì)胞培養(yǎng)成優(yōu)良植物品種，采用的是植物組織培養(yǎng)技術(shù)．
（5）從個(gè)體水平鑒定轉(zhuǎn)基因的優(yōu)良植物品種是否培育成功的方法是確定優(yōu)良性狀是否表達(dá)．

Answer 1

分析 1、基因工程的工具：
（1）限制酶：能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷裂．
（2）DNA連接酶：連接的是兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵．
（3）運(yùn)載體：常用的運(yùn)載體：質(zhì)粒、噬菌體的衍生物、動(dòng)植物病毒．
2、基因工程技術(shù)的基本步驟：
（1）目的基因的獲取：方法有從基因文庫(kù)中獲取、利用PCR技術(shù)擴(kuò)增和人工合成．
（2）基因表達(dá)載體的構(gòu)建：是基因工程的核心步驟，基因表達(dá)載體包括目的基因、啟動(dòng)子、終止子和標(biāo)記基因等．
（3）將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞：根據(jù)受體細(xì)胞不同，導(dǎo)入的方法也不一樣．將目的基因?qū)�入植物�?xì)胞的方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法；將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞最有效的方法是顯微注射法；將目的基因?qū)�入微生物�?xì)胞的方法是感受態(tài)細(xì)胞法．
（4）目的基因的檢測(cè)與鑒定：分子水平上的檢測(cè)：①檢測(cè)轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)；②檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)；③檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)．個(gè)體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等．
3、單克隆抗體制備流程：先給小鼠注射特定抗原使之發(fā)生免疫反應(yīng)，之后從小鼠脾臟中獲取已經(jīng)免疫的B淋巴細(xì)胞；誘導(dǎo)B細(xì)胞和骨髓瘤細(xì)胞融合，利用選擇培養(yǎng)基篩選出雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行抗體檢測(cè)，篩選出能產(chǎn)生特定抗體的雜交瘤細(xì)胞；進(jìn)行克隆化培養(yǎng)，即用培養(yǎng)基培養(yǎng)和注入小鼠腹腔中培養(yǎng)；最后從培養(yǎng)液或小鼠腹水中獲取單克隆抗體．

解答 解：（1）根據(jù)酶的來(lái)源不同，DNA連接酶可分為E．coliE．coliE．coliDNA連接酶和T₄DNA連接酶兩類，這二者都能連接黏性末端，此外T₄DNA連接酶還可以連接平末端，但連接平末端時(shí)的效率比較低．DNA連接酶連接形成的化學(xué)鍵稱為磷酸二脂鍵．
（2）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)可用于篩選抗癌藥物；單克隆抗體的生產(chǎn)過程利用了生物工程中的動(dòng)物細(xì)胞融合技術(shù)、動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)．
（3）若利用含卡那霉素的培養(yǎng)基篩選已導(dǎo)入抗性基因的受體細(xì)胞，應(yīng)使重組Ti質(zhì)粒中含有抗卡那霉素基因，作為標(biāo)記基因．
（4）將轉(zhuǎn)基因植物細(xì)胞培育成轉(zhuǎn)基因植株需要采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)．
（5）從個(gè)體水平鑒定轉(zhuǎn)基因的優(yōu)良植物品種是否培育成功的方法是確定優(yōu)良性狀是否表達(dá)．
故答案為：
（1）平末端                磷酸二脂鍵
（2）動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)          動(dòng)物細(xì)胞融合
（3）抗卡那霉素基因
（4）植物組織培養(yǎng)
（5）確定優(yōu)良性狀是否表達(dá)

點(diǎn)評(píng) 本題考查基因工程和細(xì)胞工程的相關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記基因工程的操作工具及其作用；識(shí)記單克隆抗體的制備過程，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題．