Question

2011年11月，武漢大學(xué)利用細菌將人的血清白蛋白基因?qū)�入水稻體內(nèi)，借助水稻合成了人的血清白蛋白，這種蛋白質(zhì)和人體自然產(chǎn)生的這類物質(zhì)是完全一致的．結(jié)合圖示回答轉(zhuǎn)基因水稻培育過程的相關(guān)問題．

（l）限制酶Mun I和限制酶EcoR I的識別序列及切割位點分別是-C↓AATTG-和-G↓AATTC--．為保證重組質(zhì)粒表達載體的準確構(gòu)建，應(yīng)該用限制酶

 

切割質(zhì)粒，用限制酶

 

切割含目的基因的DNA分子，用DNA連接酶連接目的基因和質(zhì)粒．基因表達載體的組成除目的基因和標記基因外，還包括

 

．
（2）將重組DNA分子導(dǎo)入植物受體細胞的常用方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法和

 

法．農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒上的

 

可轉(zhuǎn)移到受體細胞，并且整合到受體細胞的

 

上．
（3）為了確定轉(zhuǎn)基因水稻是否培育成功，既要用放射性同位素標記的

 

做探針進行分子雜交檢測，又要從個體水平鑒定水稻植株是否含有人的血清白蛋白．

Answer 1

考點：基因工程的原理及技術(shù)

專題：

分析：分析題圖：圖示為轉(zhuǎn)基因水稻培育過程圖，其中①為基因表達載體的構(gòu)建過程，該過程需要限制酶和DNA連接酶；②表示將基因表達載體導(dǎo)入受體細胞；③表示采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)將水稻細胞培養(yǎng)成轉(zhuǎn)基因水稻．

解答： 解：（1）由圖可知，目的基因兩側(cè)都是限制酶EcoRⅠ的切割位點，因此應(yīng)選用限制酶EcoRⅠ切割含有目的基因的外源DNA分子；基因表達載體的組成包括目的基因、標記基因、啟動子和終止子．
（2）將重組DNA分子導(dǎo)入植物受體細胞的常用方法有農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法、基因槍法和花粉管通道法．農(nóng)桿菌的Ti質(zhì)粒上的T-DNA可轉(zhuǎn)移到受體細胞，并且整合到受體細胞的染色體的DNA上．
（3）基因工程的最后步驟是目的基因的檢測與鑒定，為了確定轉(zhuǎn)基因水稻是否培育成功，既要用放射性同位素標記的人血清白蛋白基因做探針進行分子雜交檢測，又要從個體水平鑒定水稻植株是否含有人的血清白蛋白．
故答案為：
（1）MunⅠEcoRⅠ啟動子、終止子
（2）基因槍法（花粉管通道法）     T-DNA     染色體的DNA
（3）人血清白蛋白基因

點評：本題結(jié)合轉(zhuǎn)基因水稻的培育過程圖，考查基因工程的工具和操作步驟等相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的原理、工具、操作步驟及應(yīng)用，能準確判斷圖中各過程的名稱，并能根據(jù)圖中信息選擇合理的限制酶；識記目的基因?qū)�入植物受體細胞的方法等．