Question

通過動物細胞培養(yǎng)的方法可以研究某種化學物質是否能夠使染色體畸變，請你

完成下列實驗并回答有關問題。

實驗原理：有毒物質能誘導染色體畸變，根據發(fā)生染色體畸變細胞的數量（或其占全部培養(yǎng)細胞的百分數），可判斷該化學物質的致畸性的強弱。

材料、藥品、用具：   

活的小白鼠胚胎、某種化學物質、某種酶液、動物細胞培養(yǎng)液、動物細胞固定液、適宜濃度的龍膽紫溶液、生理鹽水、滅菌設備、滴管、培養(yǎng)皿、剪刀、錐形瓶、培養(yǎng)瓶、恒溫箱、載玻片、蓋玻片、顯微鏡等。

實驗步驟：

   （1）制備細胞懸浮液

把活的小白鼠胚胎放在培養(yǎng)皿中剪碎，轉入錐形瓶中，加入      酶液（寫出酶的具體名稱）處理，使胚胎組織離散成單個細胞，再加入動物細胞培養(yǎng)液，制成細胞懸浮液。

   （2）進行細胞培養(yǎng)

①取A、B二個潔凈的培養(yǎng)瓶，                        。②向A培養(yǎng)瓶中加入

適量的該化學物質并將培養(yǎng)瓶搖勻；向B瓶中加入                     。

在動物細胞培養(yǎng)過程中，由于動物細胞在培養(yǎng)瓶中貼壁生長具有              現象，所以細胞停止分裂增殖時，培養(yǎng)瓶壁上形成的細胞層數是             。

   （3）制作臨時裝片

①細胞增殖到大約第8代左右時，同時從恒溫箱中取出二個培養(yǎng)瓶，再次將瓶內動物細胞處理成細胞懸浮液，加入動物細胞固定液以便迅速殺死并固定細胞。

②靜置一段時間后，分別從各培養(yǎng)瓶底部吸取適量的細胞懸浮液，滴在與培養(yǎng)瓶有相同編號的載玻片的中央，           ，3~5min后，蓋上蓋玻片。

   （4）鏡檢和統(tǒng)計

把臨時裝片放在顯微鏡下，先用低倍鏡后用高倍鏡，尋找處于        期的細胞。

并與B組觀察結果作對比。

預期結果及相應的結論

（與B組相比較）

如果                ，則說明這種化學物質致畸性很強；

如果                ，則說明這種化學物質致畸性較弱；

如果                 ，則說明這種化學物質沒有致畸性；

 

 

Answer 1

（1）胰蛋白 

   （2）①（消毒滅菌），加入等量的細胞懸浮液

②等量生理鹽水  接觸抑制  單層（或一層）

   （3）②用適宜濃度龍膽紫溶液染色

   （4）細胞有絲分裂中

預期結果及相應的結論：

染色體畸變的細胞數量（或占全部培養(yǎng)細胞的百分數）很多

染色體畸變的細胞數量（或占全部培養(yǎng)細胞的百分數）較少

染色體畸變的細胞數量（或占全部培養(yǎng)細胞的百分數）幾乎沒有