Question

20．如圖為利用人成纖維細(xì)胞（具分裂能力、能在HAT培養(yǎng)基上存活）和小鼠骨髓瘤細(xì)胞（具分裂能力、不能在HAT培養(yǎng)基上存活）進(jìn)行人類基因定位的操作示意圖，請回答相關(guān)問題．

		雜交細(xì)胞
		A	B	C
人類 染色體	l	-	+	+
	2	+	-	+
	3	+	+	-
酶	m	+	-	+
	n	-	+	+
	p	+	-	+
	q	-	+	+

（1）圖示方法是動物細(xì)胞融合技術(shù)的應(yīng)用，該技術(shù)的基礎(chǔ)是動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)．
（2）操作所用的成纖維細(xì)胞應(yīng)傳代10代以內(nèi)，誘導(dǎo)融合時需要加入的促融劑是PEG（或滅活病毒）．
（3）人、鼠細(xì)胞先經(jīng)過細(xì)胞膜融合形成多核細(xì)胞，再經(jīng)過一次有絲分裂，形成單核細(xì)胞．
（4）HAT培養(yǎng)基起選擇培養(yǎng)作用，操作中加入鳥本苷的目的是除去成纖維細(xì)胞．細(xì)胞培養(yǎng)所需的氣體條件是95%空氣和5%CO₂，其中CO₂的主要目的是維持培養(yǎng)液的pH；除以上兩類條件外，動物細(xì)胞體外培養(yǎng)還需要營養(yǎng)和無菌無毒的環(huán)境兩項條件．
（5）上表所示為雜交細(xì)胞A、B、C中存在的人類染色體及人類特有的4 種酶（“+”表示存在，“-”表示不存在），這4種酶均為單基因編碼產(chǎn)生，據(jù)表判斷，編碼m和p酶的基因位于染色體2上，排列方式呈線性．

Answer 1

分析 1、據(jù)圖分析，成纖維細(xì)胞和小鼠骨髓瘤細(xì)胞在促融劑的作用下形成三種雜交細(xì)胞，即成纖維細(xì)胞自身融合細(xì)胞、小鼠骨髓瘤細(xì)胞自身融合的細(xì)胞和雜交細(xì)胞；在HAT培養(yǎng)基上篩選出成纖維細(xì)胞自身融合細(xì)胞和雜交細(xì)胞；加人鳥本苷的目的是除去成纖維細(xì)胞，留下雜交細(xì)胞．
2、雜交細(xì)胞A中存在2和3號染色體，表達(dá)出酶m和p；雜交細(xì)胞B存在1和2號染色體，表達(dá)出酶n和q；說明編碼m和p酶的基因位于染色體2上．

解答 解：（1）據(jù)圖分析，該技術(shù)屬于動物細(xì)胞融合技術(shù)，基礎(chǔ)是動物細(xì)胞培養(yǎng)．
（2）目前使用的正常細(xì)胞通常為10代以內(nèi)的，可以保持細(xì)胞正常的二倍體核型．成纖維細(xì)胞應(yīng)傳代10代以內(nèi)，遺傳物質(zhì)沒有發(fā)生改變的細(xì)胞株，誘導(dǎo)融合時需要加入的促融劑是PEG（或滅活病毒）．
（3）人、鼠細(xì)胞先經(jīng)過細(xì)胞膜融合形成多核細(xì)胞，經(jīng)過一次有絲分裂，形成單核細(xì)胞．
（4）據(jù)題干信息，人成纖維細(xì)胞能在HAT培養(yǎng)基上存活，而小鼠骨髓瘤細(xì)胞不能在HAT培養(yǎng)基上存活，則HAT培養(yǎng)基起選擇培養(yǎng)作用，篩選出人成纖維細(xì)胞和成纖維細(xì)胞融合的雜交細(xì)胞，操作中加人鳥本苷的目的是除去成纖維細(xì)胞，篩選出雜交細(xì)胞；動物細(xì)胞培養(yǎng)所需的氣體條件是95%空氣和5%CO₂，其中CO₂的主要目的是維持培養(yǎng)液的pH；除以上兩類條件外，動物細(xì)胞體外培養(yǎng)還需要充足的營養(yǎng)和無菌無毒的環(huán)境條件．
（5）據(jù)表判斷，雜交細(xì)胞B中不存在2號染色體，酶m和p沒有表達(dá)，說明編碼m和p酶的基因位于染色體2上，排列方式呈線性．
故答案為：
（1）動物細(xì)胞融合     動物細(xì)胞培養(yǎng)    
（2）10    PEG（或滅活病毒）
（3）有絲分裂
（4）選擇      除去成纖維細(xì)胞     維持培養(yǎng)液的pH   營養(yǎng)   無菌無毒的環(huán)境
（5）m和p        線性

點評 本題考查動物細(xì)胞融合、動物細(xì)胞培養(yǎng)、基因在染色體上等相關(guān)知識，意在考查學(xué)生運用所學(xué)知識與觀點，通過比較、分析與綜合等方法對某些生物學(xué)問題進(jìn)行解釋、推理，做出合理的判斷或得出正確的結(jié)論．