Question

【題目】根據(jù)基因工程的有關知識,回答下列問題:

（1）限制性核酸內切酶切割DNA分子后產生的片段,其末端類型有________和________。

（2）質粒運載體用EcoRⅠ切割后產生的片段如下:

為使運載體與目的基因相連,含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外,還可用另一種限制性核酸內切酶切割,該酶必須具有的特點是________。

（3）按其來源不同,基因工程中所使用的DNA連接酶有兩類,即________DNA連接酶和________DNA連接酶。

（4）反轉錄作用的模板是________,產物是________。若要在體外獲得大量反轉錄產物,常采用________技術。

（5）基因工程中除質粒外,________和________也可作為運載體。

Answer 1

【答案】黏性末端平末端切割產生的DNA片段末端與EcoRⅠ切割產生的相同大腸桿菌T4mRNA(或RNA)cDNA(或DNA)PCR噬菌體動植物病毒

【解析】

基因工程的三種工具：限制酶、DNA連接酶和載體。限制酶存在于原核生物中，識別雙鏈DNA分子的某種特定核苷酸序列，并使每一條鏈中特定部位的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開，形成的末端有黏性末端和平末端兩種。DNA連接酶能將雙鏈DNA片段“縫合”起來，恢復被限制酶切開的兩個核苷酸之間的磷酸二酯鍵，可分為E.coli DNA連接酶和T4 DNA連接酶兩大類，E.coli DNA連接酶只“縫合”黏性末端，T4 DNA連接酶黏性末端和平末端都可以“縫合”。載體能在受體細胞中復制并穩(wěn)定保存；具有一至多個限制酶切點；具有標記基因，最常用的載體是質粒，另外，動植物病毒和λ噬菌體的衍生物也可作為運載體。載體可以攜帶外源DNA片段進入受體細胞。可在細胞中進行自我復制或整合到染色體DNA上隨染色體DNA進行同步復制。

（1）限制性核酸內切酶可以將DNA分子切成兩種類型的末端，平末端和黏性末端．
（2）兩種不同酶切割之后便于相連，所產生的黏性末端必須相同．因此為使運載體與目的基因相連，含有目的基因的DNA除可用EcoRⅠ切割外，還可用另一種限制性內切酶切割，該酶必須具有的特點是切割產生的DNA片段末端與EcoRⅠ切割產生的相同。

（3）DNA連接酶可分為兩類：一類是T4 DNA連接酶，另一類是 E.coli DNA連接酶。
（4）反轉錄是以mRNA為模板逆轉錄先合成單鏈DNA，再合成雙鏈DNA，利用PCR技術進行大量擴增。
（5）基因工程中除質粒外，動植物病毒和λ噬菌體的衍生物也可作為運載體。