Question

【題目】在農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中發(fā)現(xiàn)一種廣泛使用的除草劑(含氮有機化合物)在土壤中不易降解，長期使用可污染土壤。為修復(fù)被該除草劑污染的土壤，需要選育能高效降解該除草劑的細菌。請完成下列選育的實驗方案：

步驟一：菌種浸出液的制備：

從_______________中獲取一定量的樣本，然后置于無菌水中，震蕩一定時間，備用。

步驟二：配置菌種選育培養(yǎng)基并滅菌：

所配制的培養(yǎng)基的特點是____________________和 _______________________。

步驟三：

（1）劃線接種

（2）_________________________________________________________________。

（3）_________________________________________________________________。

（4）常用的接種劃線工具是___________________。

某同學(xué)在純化菌株時，劃線接種后一段時間后，平板的第一劃線區(qū)域長滿致密的菌苔，第二劃線區(qū)域無菌落，造成劃線無菌落可能的操作失誤是________________________。

Answer 1

【答案】使用過除草劑的土壤 固體 含不同濃度除草劑 在適宜的溫度等條件進行倒置培養(yǎng)一定時間 觀察選取在較高濃度下除草劑的培養(yǎng)基中大菌落 接種環(huán) 接種環(huán)灼燒后未冷卻或接種劃線未從第一區(qū)域開始

【解析】

（1）步驟一：由于該除草劑為含氮有機物，所以篩選能高效降解該除草劑的細菌，應(yīng)在使用過除草劑的土壤取樣，并使用含該除草劑為唯一氮源的選擇培養(yǎng)基。
步驟二：所配制的培養(yǎng)基為固體培養(yǎng)基并需要配置含不同濃度除草劑的培養(yǎng)基。
步驟三：
（2）接種后應(yīng)該進行培養(yǎng)，即在適宜的溫度等條件進行倒置培養(yǎng)一定時間。
（3）觀察選取在較高濃度下除草劑的培養(yǎng)基中的大菌落。
（4）平板劃線法的接種工具是接種環(huán)。根據(jù)題意分析，該同學(xué)的失誤是接種環(huán)灼燒后未冷卻導(dǎo)致菌種被燙死，或接種劃線未從第一區(qū)域開始，即二次劃線起始時就沒有菌種。