Question

18．酶解法制備原生質(zhì)體的原理是利用酶溶液對細(xì)胞壁成分的降解作用．蝸牛酶液從蝸牛（以植物為食）消化腺中提��；果膠酶、纖維素酶從微生物中提�。疄榱搜芯坎煌�酶液的酶解效果，某實(shí)驗(yàn)小組取無菌煙草幼葉，切成相同大小的小片，等量放入6支試管中，試劑用量和實(shí)驗(yàn)結(jié)果列于下表．請回答有關(guān)問題．

試管編號 項目	I	Ⅱ	Ⅲ	Ⅳ	V	Ⅵ
蒸餾水（mL）	2	0	1	1	1	1
緩沖液（mL）	0	X	1	0.5	0.5	0.5
果膠酶液（mL）	0	0	0	0.5	0	0
蝸牛酶液（mL）	0	0	0	0	0.5	0
纖維素酶液（mL）	0	0	0	0	0	0.5
實(shí)驗(yàn)結(jié)果（綠色深淺程度）	-	-	-	+++	++++	++

（注：“+”越多表示綠色越深，“一”表示顏色無顯著變化）
（1）實(shí)驗(yàn)過程中，需要輕搖試管，其目的是為了使細(xì)胞壁與酶充分接觸，提高酶解效果，使原生質(zhì)體從葉小片中游離出來，以便觀察懸浮液綠色的深淺．
（2）從綠色的深淺可推測：蝸牛酶液酶解效果最好，原因是蝸牛酶液含有果膠酶和纖維素酶等多種酶．該實(shí)驗(yàn)中Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ是空白對照組，表中X應(yīng)填2mL．
（3）用網(wǎng)篩過濾原生質(zhì)體到離心管內(nèi)，離心后收集沉淀物，并用等滲溶液洗滌．原生質(zhì)體是否符合要求還需進(jìn)行檢驗(yàn)，其檢驗(yàn)的方法是低滲漲破法．

Answer 1

分析 原生質(zhì)體是植物細(xì)胞去除細(xì)胞壁后的結(jié)構(gòu)，而去除細(xì)胞壁需用相應(yīng)的酶（纖維素酶和果膠酶）進(jìn)行處理．

解答 解：（1）實(shí)驗(yàn)過程中，需要輕搖試管，以使細(xì)胞壁與酶充分接觸，提高酶解效果．
（2）分析實(shí)驗(yàn)表格，試管V中加入了蝸牛酶液，綠色最深，說明原生質(zhì)體從葉小片中游離出來的最多，即該溶液去除細(xì)胞壁效果最好，原因是蝸牛以植物為食，唾液中含有果膠酶和纖維素酶．I、Ⅱ、Ⅲ沒有添加酶溶液為空白對照組，其目的是排除無關(guān)變量的干擾；而添加的溶液的量為無關(guān)變量，因此X處應(yīng)為2ml．
（3）離心后收集沉淀物，并用等滲溶液清洗，目的是保持細(xì)胞正常形態(tài)．原生質(zhì)體是否符合要求還需進(jìn)行檢驗(yàn)，其檢驗(yàn)的方法是低滲漲破法，即看是否在低滲溶液中會吸水漲破．
故答案為：
（1）為了使細(xì)胞壁與酶充分接觸，提高酶解效果
（2）蝸牛酶液     果膠酶和纖維素酶Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ2
（3）等滲溶液        低滲漲破法

點(diǎn)評 本題以圖表為載體，考查學(xué)生獲取和處理信息的能力，分析和解決問題的能力．實(shí)驗(yàn)過程中可以變化的因素稱為變量．其中人為改變的變量稱做自變量，隨著自變量的變化而變化的變量稱做因變量．除自變量外，實(shí)驗(yàn)過程中可能還會存在一些可變因素，對實(shí)驗(yàn)結(jié)果造成影響，這些變量稱為無關(guān)變量．要注意無關(guān)變量應(yīng)該相同且適宜．