Question

6．科研人員將綠色熒光蛋白（GTP）基因?qū)�入金魚(yú)的受精卵中進(jìn)行有關(guān)研究，請(qǐng)回答：
（1）上述過(guò)程中的GTP基因稱為目的基因，該基因可由mRNA反轉(zhuǎn)錄形成．
（2）已知GTP基因的DNA兩端分別有EcoR I、Sma I切割位點(diǎn)，切割下來(lái)的GTP基因含有黏性 末端和平末端．
（3）質(zhì)粒用EcoR I、Sma I切割之后，需用DNA連接酶將GTP基因與其連接形成重組質(zhì)粒．
（4）GTP基因能否在受體細(xì)胞中穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵是目的基因是否插入到受體細(xì)胞的DNA上，可采用DNA分子雜交技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)．
（5）構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)，可用GTP代替抗氨芐青霉素基因作為標(biāo)記基因．
（6）目前科學(xué)家們通過(guò)蛋白質(zhì)工程制造出了藍(lán)色熒光蛋白、黃色熒光蛋白等，該工程直接改造的是GFP分子，還是改造GFP基因？GFP基因．

Answer 1

分析 1、目的基因：主要指編碼蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu)基因，也可以是一些具有調(diào)控作用的因子．獲得目的基因的方法：①?gòu)幕�因文�?kù)中獲取  ②利用PCR技術(shù)擴(kuò)增  ③人工合成（化學(xué)合成）．
2、限制性核酸內(nèi)切酶主要是從原核生物中分離純化出來(lái)的．其能夠識(shí)別雙鏈DNA分子的某種特定的核苷酸序列，并且使每一條鏈中特定部位的兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵斷開(kāi)，因此具有專一性．結(jié)果是經(jīng)限制酶切割產(chǎn)生的DNA片段末端通常有兩種形式：黏性末端和平末端．DNA連接酶連接的是兩個(gè)核苷酸之間的磷酸二酯鍵．在構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，DNA連接酶將目的基因和質(zhì)粒重組．
3、將目的基因?qū)�入�?dòng)物細(xì)胞的方法：顯微注射技術(shù)．（最有效一種方法）．具體操作程序：目的基因表達(dá)載體提純→取卵（受精卵）→顯微注射→注射了目的基因的受精卵移植到雌性動(dòng)物的子宮或輸卵管內(nèi)發(fā)育→新性狀動(dòng)物．

解答 解：（1）將綠色熒光蛋白（GTP）基因?qū)�入金魚(yú)的受精卵中進(jìn)行有關(guān)研究，說(shuō)明GTP基因是目的基因．獲取目的基因的方法有很多，可以通過(guò)mRNA反轉(zhuǎn)錄法人工合成．
（2）據(jù)題可知EcoRI、SmaI上限制性酶，它們分別可將目的基因切割，并產(chǎn)生黏性末端和平末端．
（3）在構(gòu)建基因表達(dá)載體時(shí)，需要DNA連接酶將目的基因和質(zhì)粒中被限制酶切割的末端連接．
（4）GTP基因能否在受體細(xì)胞中穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵是目的基因是否插入到受體細(xì)胞的DNA上，可采用DNA分子雜交技術(shù)進(jìn)行檢測(cè)．
（5）構(gòu)建重組質(zhì)粒時(shí)，可用GTP代替抗氨芐青霉素基因作為標(biāo)記基因，用于鑒別和篩選含有目的基因的受體細(xì)胞．
（6）目前科學(xué)家們通過(guò)蛋白質(zhì)工程制造出了藍(lán)色熒光蛋白、黃色熒光蛋白等，該工程是直接改造GFP基因．
故答案為：
（1）目的基因  反轉(zhuǎn)錄  
（2）黏性    平
（3）DNA連接酶
（4）目的基因是否插入到受體細(xì)胞的DNA上   DNA分子雜交
（5）標(biāo)記基因   
（6）蛋白質(zhì)  GFP基因

點(diǎn)評(píng) 本題考查了基因工程的有關(guān)知識(shí)，要求考生能夠掌握基因工程的操作步驟，識(shí)記基因工程的操作工具及作用，能夠結(jié)合所學(xué)知識(shí)準(zhǔn)確答題，難度適中．