Question

【題目】環(huán)境污染物多聚聯(lián)苯難以降解，受其污染的土壤中常有重金屬污染同時存在。研究發(fā)現(xiàn)聯(lián)苯降解菌內(nèi)的聯(lián)苯水解酶是催化多聚聯(lián)苯降解的關(guān)鍵酶。回答下列問題：

（1）為了從富含多聚聯(lián)苯的環(huán)境中分離聯(lián)苯降解菌，培養(yǎng)基中加入多聚聯(lián)苯作為______，該培養(yǎng)基屬于______（填“選擇”或“鑒定”）培養(yǎng)基。用平板劃線法純化該細(xì)菌時，第2次劃線及其以后劃線總是從上次劃線的末端開始是為了______。

（2）為了能夠反復(fù)利用聯(lián)苯水解酶，可以采用______技術(shù)，該技術(shù)的另一個優(yōu)點是______。

（3）若從聯(lián)苯降解菌中分離并得到純度較高的聯(lián)苯水解酶，純化該酶常用的方法是______，采用該方法先分離出分子質(zhì)量______的蛋白質(zhì)。

（4）如圖實線表示聯(lián)苯水解酶催化的反應(yīng)速度與酶濃度關(guān)系，虛線表示在其他條件不變情況下，底物濃度增加一倍，反應(yīng)速度與酶濃度的關(guān)系，能正確表示兩者關(guān)系的是______

Answer 1

【答案】（唯一）碳源 選擇 將聚集的菌體逐漸稀釋以便獲得單個菌落 固定化酶 提高產(chǎn)物的純度 凝膠色譜法 較大 B

【解析】

培養(yǎng)基根據(jù)用途分為：選擇培養(yǎng)基、鑒別培養(yǎng)基。

常見的接種方法：平板劃線法和稀釋涂布平板法。

固定化酶和固定化細(xì)胞技術(shù)是利用物理或化學(xué)方法將酶或細(xì)胞固定在一定空間內(nèi)的技術(shù)，包括包埋法、物理吸附法和化學(xué)結(jié)合法。

（1）為了從富含多聚聯(lián)苯的環(huán)境中分離聯(lián)苯降解菌，應(yīng)該用以多聚聯(lián)苯作為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基，只有聯(lián)苯降解菌可以存活。用平板劃線法純化該細(xì)菌時，在進行第二次以及其后的劃線操作時要從上一次劃線的末端開始劃線。每次劃線后，線條末端細(xì)菌的數(shù)目比線條起始處要少，每次從上一次劃線的末端開始，能使細(xì)菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，最終能得到由單個細(xì)菌繁殖而來的菌落。

（2）為了能夠反復(fù)利用聯(lián)苯水解酶，可以采用固定化酶技術(shù)，該技術(shù)可使酶與產(chǎn)物分開，因此提高了產(chǎn)物的純度。

（3）純化該酶常用的方法是凝膠色譜法，該方法是根據(jù)相對分子質(zhì)量的大小來分離蛋白質(zhì)的有效方法，相對分子質(zhì)量小的蛋白質(zhì)容易進入凝膠內(nèi)部的通道，路程長，移動的速度慢，相對分子質(zhì)量大的蛋白質(zhì)不容易進入凝膠內(nèi)部的通道，路程短，移動的速度快，因此采用該方法先分離出分子質(zhì)量較大的蛋白質(zhì)。

（4）開始時，酶濃度較低，無論底物是否加倍都不能增加反應(yīng)的速率；隨著酶濃度增大，增加底物，反應(yīng)速率會增加，故選B。