Question

【題目】下圖表示細(xì)胞融合技術(shù)的一些過程。閱讀下列材料，并簡要回答下列問題。

抗生素	濃度 （μg/ml）	抗性
		I菌	JD菌
慶大霉素	3	－	－
利福平	3	－	＋
卡那霉素	3	＋	－
紅霉素	3	－	＋

(注“十”代表有抗性，“-”代表無抗性）

材料一:近年來，細(xì)胞工程已進(jìn)入高速發(fā)展階段，已經(jīng)成為生物學(xué)領(lǐng)域中一顆耀眼的明星。該工程可

在細(xì)胞水平或細(xì)胞器水平上，按照人們的意愿獲得新型生物或特種細(xì)胞產(chǎn)品。

材料二：微生物采油的關(guān)鍵技術(shù)是獲得性能優(yōu)異的菌種，應(yīng)用原生質(zhì)體融合技術(shù)將兩種微生物進(jìn)行

融合，構(gòu)建耐中高溫采油微生物引起了科學(xué)家的廣泛關(guān)注。宋紹富等人選用細(xì)菌I和細(xì)菌JD先后

進(jìn)行了各自抗生素抗性以及融合實驗的相關(guān)研究。研究發(fā)現(xiàn)，I菌與JD菌對不同抗生素的抗性是

不同的，測量結(jié)果見上表。

（1）上圖中，若A細(xì)胞和B細(xì)胞均為植物細(xì)胞，細(xì)胞融合完成的標(biāo)志是________ ；形成的D細(xì)胞還要應(yīng)用_______________技術(shù)將其培養(yǎng)成植株。

（2）上圖中，若A細(xì)胞和B細(xì)胞均為動物細(xì)胞，與植物細(xì)胞融合相比，從A細(xì)胞和B細(xì)胞到C細(xì)胞的過程中，____________________是誘導(dǎo)動物細(xì)胞融合特有的誘導(dǎo)因素，該過程說明了細(xì)胞膜具有____________。

（3）利用I菌和JD菌進(jìn)行細(xì)胞融合時，首先應(yīng)使用____________________法去除菌體的細(xì)胞壁，將獲取______________________的保存在等滲溶液中待用。

（4）在對I菌和JD菌融合后的融合子進(jìn)行篩選時，比較理想的是在培養(yǎng)基中添加3μg/ml紅霉素（或3μg/ml利福平）與___________兩種抗生素，此種培養(yǎng)基稱為____________培養(yǎng)基。

Answer 1

【答案】雜種細(xì)胞(或C細(xì)胞）再生出細(xì)胞壁植物組織培養(yǎng) 滅活的病毒 （一定的）流動性 酶解 原生質(zhì)體 3μg/ml卡那霉素 選擇

【解析】

試題據(jù)圖分析，A細(xì)胞和B細(xì)胞融合形成C細(xì)胞，可表示植物細(xì)胞的原生質(zhì)體融合、動物細(xì)胞融合、受精作用和植物體細(xì)胞雜交。

（1）植物細(xì)胞融合完成的標(biāo)志是雜種細(xì)胞壁的再生，雜種細(xì)胞形成后經(jīng)過植物組織培養(yǎng)技術(shù)可將之培養(yǎng)成完整的植株。

（2）與植物細(xì)胞融合相比，動物細(xì)胞融合特有的誘導(dǎo)融合的方法是滅活的病毒，細(xì)胞融合依據(jù)的原理是細(xì)胞膜的流動性。

（3）I菌和JD菌融合前，應(yīng)該先用沒接法將細(xì)菌的細(xì)胞壁出去，再將獲得的原生質(zhì)體保存在等滲溶液中待用。

（4）根據(jù)表格分析，I菌對卡那霉素有抗性，對利福平、紅霉素沒有抗性，而JD菌正好相反，所以在對I菌和JD菌融合后的融合子進(jìn)行篩選時，比較理想的是在培養(yǎng)基中添加3μg/ml紅霉素（或3μg/ml利福平）與3μg/ml卡那霉素兩種抗生素，此種培養(yǎng)基稱為選擇培養(yǎng)基。

細(xì)胞工程	植物體細(xì)胞雜交	動物細(xì)胞融合
理論基礎(chǔ)	細(xì)胞的全能性、細(xì)胞膜的流動性	細(xì)胞增殖、細(xì)胞膜的流動性
融合前處理	酶解法去除細(xì)胞壁 （纖維素酶、果膠酶）	注射特定抗原，免疫處理正常小鼠
誘導(dǎo)手段	物理法：離心、振動、電激 化學(xué)法：聚乙二醇（PEG）	物理法：離心、振動、電激 化學(xué)法：聚乙二醇 生物法：滅活的病毒（滅活的仙臺病毒）
誘導(dǎo)過程	第一步：原生質(zhì)體的制備（酶解法） 第二步：原生質(zhì)體融合（物、化法） 第三步：雜種細(xì)胞的篩選和培養(yǎng) 第四步：雜種植株的誘導(dǎo)與鑒定	正常小鼠免疫處理動物細(xì)胞的融合 （物、化、生法）雜交瘤細(xì)胞的篩 選與培養(yǎng)專一抗體檢驗陽性細(xì)胞培 養(yǎng)單克隆抗體的提純
用途和意義	克服遠(yuǎn)緣雜交的不親和障礙， 大大擴(kuò)展雜交的親本組合范圍 應(yīng)用：白菜——甘藍(lán)等雜種植株	（1）制備單克隆抗體 （2）診斷、治療、預(yù)防疾病，例如“生物導(dǎo)彈”治療癌癥