Question

科學(xué)家將人的生長激素基因與某種細(xì)菌（不含抗生素抗性基因）的DNA分子進(jìn)行重組，并成功地在該細(xì)菌中得以表達(dá)（如圖）．請據(jù)圖分析回答：
（1）過程①所示獲取目的基因的方法是

 

．
（2）細(xì)菌是理想的受體細(xì)胞，這是因為它

 

．
（3）質(zhì)粒A與目的基因結(jié)合時，首先需要用

 

酶將質(zhì)粒切開“缺口”，然后用

 

酶將質(zhì)粒與目的基因“縫合”起來．
（4）若將細(xì)菌B先接種在含有

 

的培養(yǎng)基上能生長，說明該細(xì)菌中已經(jīng)導(dǎo)入外源質(zhì)粒，但不能說明外源質(zhì)粒是否成功插入目的基因；若將細(xì)菌B再重新接種在含有

 

的培養(yǎng)基上不能生長，則說明細(xì)菌B中已經(jīng)導(dǎo)入了插入目的基因的重組質(zhì)粒．
（5）檢測工程菌中的生長激素基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA和是否翻譯出生長激素，可采用的技術(shù)分別是

 

、

 

．

Answer 1

考點：基因工程的原理及技術(shù)

專題：

分析：分析題圖：①是利用反轉(zhuǎn)錄法合成目的基因（人的生長激素基因）的過程；②表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程，該過程需要限制酶和DNA連接酶；③是將目的基因?qū)�入受體細(xì)胞的過程；最后檢測和篩選出工程菌．

解答： 解：（1）由圖可知，①過程中獲取目的基因的方法是反轉(zhuǎn)錄法（逆轉(zhuǎn)錄法）．
（2）細(xì)菌繁殖快、單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)相對較少，是基因工程中理想的受體細(xì)胞．
（3）構(gòu)建基因表達(dá)載體時，先用限制酶酶切割質(zhì)粒，再用DNA連接酶將質(zhì)粒與目的基因連接形成重組質(zhì)粒．
（4）由圖可知，構(gòu)建基因表達(dá)載體時，目的基因的插入破壞了四環(huán)素抗性基因，但沒有破環(huán)氨芐青霉素抗性基因，因此導(dǎo)入重組質(zhì)粒的細(xì)菌能在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上生存，但不能在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上生存．若將細(xì)菌B先接種在含有氨芐青霉素的培養(yǎng)基上能生長，說明該細(xì)菌中已經(jīng)導(dǎo)入外源質(zhì)粒，但不能說明外源質(zhì)粒是否成功插入目的基因；若將細(xì)菌B再重新接種在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上不能生長，則說明細(xì)菌B中已經(jīng)導(dǎo)入了插入目的基因的重組質(zhì)粒．
（5）檢測工程菌中的生長激素基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA，可采用分子雜交技術(shù)；檢測生長激素基因是否翻譯出生長激素，可采用抗原-抗體雜交技術(shù)．
故答案為：
（1）反轉(zhuǎn)錄法（逆轉(zhuǎn)錄法）
（2）繁殖快、單細(xì)胞、遺傳物質(zhì)相對較少
（3）限制性內(nèi)切酶        DNA連接酶
（4）氨芐青霉素           四環(huán)素
（5）分子雜交          抗原-抗體雜交

點評：本題結(jié)合利用基因工程生產(chǎn)人生長激素的流程圖，考查基因工程的相關(guān)知識，要求考生識記基因工程的原理、工具及操作步驟，掌握各步驟中需要注意的細(xì)節(jié)或采用的方法，能結(jié)合圖中信息答題，屬于考綱識記和理解層次的考查．