【題目】金屬硫蛋白(MT)是一類廣泛存在的金屬結(jié)合蛋白,某研究小組計劃通過多聚酶鏈式反應(yīng)(PCR)擴增獲得目的基因,構(gòu)建轉(zhuǎn)基因工程菌,用于重金屬廢水的凈化處理。PCR擴增過程示意圖如下,請回答下列問題:

(1)從高表達MT 蛋白的生物組織中提取mRNA,通過______________獲得______________用于PCR擴增。

(2)設(shè)計一對與MT基因兩端序列互補配對的引物(引物1和引物2),為方便構(gòu)建重組質(zhì)粒,在引物中需要增加適當?shù)?/span>______________位點。設(shè)計引物時需要避免引物之間形成______________,而造成引物自連。

(3)圖中步驟1代表______________,步驟2代表退火,步驟3代表延伸,這三個步驟組成一輪循環(huán)。

(4)PCR擴增時,退火溫度的設(shè)定是成敗的關(guān)鍵。退火溫度過高會破_________的堿基配對。退火溫度的設(shè)定與引物長度、堿基組成有關(guān),長度相同但____________的引物需要設(shè)定更高的退火溫度。

(5)如果PCR反應(yīng)得不到任何擴增產(chǎn)物,則可以采取的改進措施有___________(填序號:升高退火溫度 降低退火溫度 重新設(shè)計引物)。

【答案】 逆轉(zhuǎn)錄 cDNA 限制性核酸內(nèi)切酶 堿基互補配對 變性 引物與模板 GC含量高 ②③

【解析】(1)PCR擴增目的基因,首先要有目的基因作為模板,所以從高表達MT蛋白的生物組織中提取mRNA,通過逆轉(zhuǎn)錄獲得cDNA,從而用于PCR擴增。(2)構(gòu)建重組質(zhì)粒,首先用限制酶切割含目的基因的DNA片段和質(zhì)粒,所以位于目的基因兩端的引物中需要增加適量的限制酶位點。設(shè)計的引物之間不能有堿基互補配對,否則引物自連,不能與模板相連。(3)圖中步驟1、2、3分別表示變性、退火、延伸,這三個步驟組成一輪循環(huán)。(4)退火表示引物與模板鏈相連,若溫度過高會破壞引物與模板的堿基配對。由于G-C間三個氫鍵,A-T間兩個鍵,所以G-C含量越高的引物,退火溫度越高。(5)PCR反應(yīng)得不到任何擴增產(chǎn)物,可能是退火溫度過高,導(dǎo)致引物與模板不能相連,或引物間相互配對,引物自連,不能與模板相連,可通過降低退火溫度或重新設(shè)計引物進行改進。

練習冊系列答案
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科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】糖類是生物體生命活動的主要能源物質(zhì),蛋白質(zhì)是生命活動的體現(xiàn)者.圖一為糖類的概念圖,圖二是某種需要能量的蛋白質(zhì)降解過程,科學(xué)家發(fā)現(xiàn):一種被稱為泛素的多肽在該過程中起重要作用.泛素激活酶E1將泛素分子激活,然后由E1將泛素交給泛素結(jié)合酶E2,最后在泛素連接酶E3的指引下將泛素轉(zhuǎn)移到靶蛋白上.這一過程不斷重復(fù),靶蛋白就被綁上一批泛素分子.被泛素標記的靶蛋白很快就送往細胞內(nèi)一種被稱為蛋白酶體的結(jié)構(gòu)中進行降解.整個過程如圖二所示.請分析回答:

1)如果某種單糖A為果糖,則它與葡萄糖縮合失去1分子水后形成的物質(zhì) .如果某種單糖A經(jīng)縮合反應(yīng)形成物質(zhì)作為動物細胞中重要的儲存能量物質(zhì),則物質(zhì) ;

2)如果某種單糖A與磷酸和堿基結(jié)合形成物質(zhì),其中堿基是尿嘧啶,則形成的物質(zhì) ,它是構(gòu)成 (中文名)的基本單位之一.

3)蛋白質(zhì)在生物體內(nèi)具有多種重要功能,根據(jù)圖二材料可推測出蛋白質(zhì)的一項具體功能是

4)細胞內(nèi)E1、E2E3在蛋白質(zhì)降解過程中所起的作用不同,從分子水平上分析,其原因是

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科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】研究小組探究了萘乙酸(NAA)對某果樹扦插枝條生根的 影響,結(jié)果如下圖。下列相關(guān)敘述正確的是

A. 自變量是 NAA,因變量是平均生根數(shù)

B. 不同濃度的 NAA 均提高了插條生根率

C. 生產(chǎn)上應(yīng)優(yōu)選 300 mg/ L NAA 處理插條

D. 400 mg/ L NAA 對生根數(shù)的增加具有促進效果

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科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】如圖為人體穩(wěn)態(tài)調(diào)節(jié)的部分示意圖,其中數(shù)字①~⑦表示過程,字母a~d表示激素,甲~丙表示器官、結(jié)構(gòu)或細胞。請據(jù)圖回答下列問題:

(1)當人大量失水后,調(diào)節(jié)過程為________(填數(shù)字),d表示____________,乙表示________

(2)過程④體現(xiàn)的激素調(diào)節(jié)方式屬于________調(diào)節(jié)。

(3)當血糖濃度高出正常范圍時,下丘腦通過⑦使甲所分泌的________增多,它與________________________拮抗,共同調(diào)節(jié)血糖平衡。

(4)連接神經(jīng)調(diào)節(jié)和激素調(diào)節(jié)的樞紐是________,c作用的靶細胞是________

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科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】如圖一所示表示燕麥胚芽鞘在單側(cè)光照射下的生長情況,圖二表示胚芽鞘對不同濃度生長素的不同反應(yīng),則圖三中表示 a、b兩點生長素濃度變化的曲線反應(yīng)分別依次是( 。
A.①和②
B.①和③
C.②和③
D.②和④

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科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】下面三個裝置可用于研究萌發(fā)的種子的呼吸作用的方式及其產(chǎn)物,有關(guān)分析不正確的是

A. 甲裝置可用于探究呼吸作用是否產(chǎn)生熱量

B. 乙裝置有色液滴向左移動,說明種子萌發(fā)只進行有氧呼吸

C. 丙裝置可用于探究萌發(fā)的種子的呼吸作用是否產(chǎn)生CO2

D. 三個裝置中的種子都必須進行消毒處理,都需要設(shè)置對照實驗

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科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】如圖是生物體內(nèi)核酸的基本組成單位——核苷酸的模式圖,相關(guān)敘述不正確的是

A. 若a為核糖,則m有4種,分別是A、U、G、C

B. 若m為鳥嘌呤,則b的名稱是鳥嘌呤核糖核苷酸或鳥嘌呤脫氧核苷酸

C. 構(gòu)成人體遺傳物質(zhì)的b共有8種,a有2種,m有5種

D. 在HIV和SARS病毒中共可以檢測到1種a,4種m,4種b

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科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】已知A與a、B與b、C與c3對等位基因自由組合,基因型分別為AaBbCc、AabbCc的兩個體進行雜交.下列關(guān)于雜交后代的推測,正確的是( 。
A.表現(xiàn)型有8種,AaBbCc個體的比例為
B.表現(xiàn)型有4種,aaBbcc個體的比例為
C.表現(xiàn)型有8種,Aabbcc個體的比例為
D.表現(xiàn)型有8種,aaBbCc個體的比例為

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科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】當人體血糖濃度偏高時,質(zhì)膜中的某種葡萄糖載體可將葡萄糖轉(zhuǎn)運至肝細胞內(nèi),血糖濃度偏低時則轉(zhuǎn)運方向相反。下列敘述正確的是(

A.該載體在血糖濃度偏低時的轉(zhuǎn)運需要消耗ATP

B.轉(zhuǎn)運速率隨血糖濃度升高不斷增大

C.轉(zhuǎn)運方向不是由該載體決定的

D.胰島素促進葡萄糖運出肝細胞

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