Question

20．為檢測消毒前后牛奶中細(xì)菌含量變化情況，做如圖1操作．用無菌吸管從三角燒瓶中吸取1mL生牛奶稀釋液至盛有9mL無菌水的試管中，如此重復(fù)3次，將10mL生牛奶稀釋到10^-4濃度后，取0.1mL滴在培養(yǎng)基上．

（1）牛奶在飲用前都要經(jīng)過巴氏消毒，以殺死有害微生物．巴氏消毒的方法是70-75℃煮30分鐘（80℃煮15分鐘）．
（2）將牛奶稀釋液滴加在培養(yǎng)基上進(jìn)行涂布，應(yīng)選擇如圖2所示的涂布工具是B．
該涂布工具最合適的滅菌方法是C．
A．火焰灼燒   B．高溫高壓滅菌   C．酒精擦拭    D．紫外線照射
（3）消毒后牛奶中絕大部分細(xì)菌被殺死，若用稀釋培養(yǎng)法檢測消毒后牛奶是否含有細(xì)菌，則在操作步驟上應(yīng)作什么改動(dòng)？稀釋次數(shù)減少．
（4）從生牛奶取樣培養(yǎng)得到的菌落中，混有各種雜菌，從中檢測出大腸桿菌的方法是，在培養(yǎng)基中加入伊紅美藍(lán)，具有（金屬光澤的紫）黑色特征可以鑒別大腸桿菌．

Answer 1

分析 圖1為稀釋涂布平板法，圖2中A為接種環(huán)，B為涂布器，C為滴管，D為接種針．
滅菌是指使用強(qiáng)烈的理化因素殺死物體內(nèi)外所用的微生物（包括芽孢和孢子），常用的方法主要有灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌，適用對(duì)象主要有接種環(huán)、接種針、玻璃器皿、培養(yǎng)基等．消毒是指使用較為溫和的物理或化學(xué)方法殺死物體表面或內(nèi)部的部分微生物（不包芽孢和孢子），常用的方法主要有煮沸消毒法、巴氏消毒法、化學(xué)藥劑消毒法、紫外線消毒法，適用對(duì)象主要有操作空間、某些液體、雙手等．稀釋涂布平板法常用來進(jìn)行微生物的計(jì)數(shù)．

解答 解：（1）常用的消毒方法主要有煮沸消毒法、巴氏消毒法、化學(xué)藥劑消毒法、紫外線消毒法．巴氏消毒的方法是指70-75℃煮30分鐘或80℃煮15分鐘，使用這種方法對(duì)生鮮牛奶進(jìn)行消毒的好處是牛奶的營養(yǎng)成分不被破壞．
（2）將液體菌種接種在固體培養(yǎng)基上常用的方法主要是稀釋涂布平板法，所用的接種工具是涂布器．即圖2中的B．為防止雜菌污染，該工具應(yīng)浸泡于酒精中，涂布前應(yīng)將涂布器引燃（灼燒）后待冷卻．
（3）消毒后的牛奶中絕大部分細(xì)菌被殺死，若繼續(xù)用該方法檢測消毒后的牛奶中細(xì)菌的數(shù)量，由于細(xì)菌數(shù)目減少，故應(yīng)稀釋次數(shù)減少．
（4）檢測大腸桿菌的方法是在培養(yǎng)基中加人伊紅美藍(lán)，菌落具有（金屬光澤的紫）黑色特征的可以認(rèn)定為大腸桿菌．
故答案為：
（1）70-75℃煮30分鐘（80℃煮15分鐘） 
（2）B    B
（3）稀釋次數(shù)減少
（4）伊紅美藍(lán)  （金屬光澤的紫）黑色

點(diǎn)評(píng) 本題主要考查微生物的培養(yǎng)的相關(guān)知識(shí)，關(guān)鍵是要求學(xué)生弄清滅菌與消毒的概念、方法、適用對(duì)象和微生物的接種與計(jì)數(shù)．