Question

【題目】肥胖已經(jīng)嚴(yán)重危害人類健康．為研究發(fā)酵大麥提取物對3T3﹣L1前脂肪細(xì)胞分化的影響，科研人員進(jìn)行了相關(guān)實驗．
（1）3T3﹣L1前脂肪細(xì)胞在胰島素（INS）、地塞米松（DEX）和3﹣異丁基﹣1﹣甲基﹣黃嘌呤（IBMX）的誘導(dǎo)下，基因表達(dá)，分化為成熟脂肪細(xì)胞，因此經(jīng)過三種物質(zhì)誘導(dǎo)的3T3﹣L1前脂肪細(xì)胞是肥胖研究常用的細(xì)胞模型．
（2）3T3﹣L1前脂肪細(xì)胞培養(yǎng)液中除了具有基本的營養(yǎng)外，還需加入一定量的 ， 并置于中培養(yǎng)．
（3）將一定數(shù)目的植物乳桿菌接種到經(jīng)過處理的粉碎過篩大麥和水的混合液中，制備發(fā)酵大麥提取物（LFBE）．除不接種植物乳桿菌外，其余操作方法相同，制備未發(fā)酵大麥提取物（RBE）．
（4）研究發(fā)酵大麥提取物對細(xì)胞分化的影響，實驗處理及結(jié)果如下．（表格中+表示加入了該物質(zhì)，﹣表示未加入）

組別 處理方法	模型組	空白組	對照組（提取物濃度ug/mL）			實驗組（提取物濃度ug/mL）
			100	200	400	100	200	400
培養(yǎng)液	+	+	+	+	+	+	+	+
1	+	﹣	﹣	﹣	﹣	﹣	﹣	﹣
2	﹣	﹣	+	+	+	﹣	﹣	﹣
3	﹣	﹣	﹣	﹣	﹣	+	+	+

表格處理方法1，2，3分別是、、 ．
②分析實驗結(jié)果，說明 ．
（5）為進(jìn)一步研究LFBE抑制3T3﹣L1前脂肪細(xì)胞分化的機(jī)理，科研人員提取各組細(xì)胞中總RNA，經(jīng)過程獲得cDNA，再利用PCR技術(shù)擴(kuò)增出肥胖相關(guān)基因．在相同條件下，PCR產(chǎn)物的量可以間接反映細(xì)胞中的含量．若檢測結(jié)果是 ， 則說明LFBE抑制相關(guān)基因轉(zhuǎn)錄從而抑制3T3﹣L1前脂肪細(xì)胞分化．

Answer 1

【答案】
（1）選擇性
（2）動物血清（可換成抗生素以防止污染）；CO2（恒溫）培養(yǎng)箱
（3）（高壓蒸汽）滅菌
（4）INS．DEX．IBMX；RBE；LFBE；LFBE明顯抑制3T3﹣L1前脂肪細(xì)胞分化且隨濃度增加，抑制能力加強(qiáng)
（5）逆轉(zhuǎn)錄；肥胖相關(guān)基因mRNA；LFBE組肥胖相關(guān)基因mRNA數(shù)量明顯低于模型組和RBE組，高于空白組
【解析】解：（1）細(xì)胞分化是基因選擇性表達(dá)的結(jié)果．（2）細(xì)胞培養(yǎng)液中除了具有基本的營養(yǎng)外，還需加入一定量的動物血清（可換成抗生素以防止污染），并置于 CO2（恒溫）培養(yǎng)箱中培養(yǎng)．（3）培養(yǎng)基需要高壓蒸汽滅菌．（4）①本實驗是研究發(fā)酵大麥提取物對細(xì)胞分化的影響，根據(jù)題（1）中“3T3﹣L1前脂肪細(xì)胞在胰島素（INS）、地塞米松（DEX）和3﹣異丁基﹣1﹣甲基﹣黃嘌呤（IBMX）的誘導(dǎo)下，分化為成熟脂肪細(xì)胞”題（3）中“植物乳桿菌接種到粉碎過篩大麥和水的混合液中，制備發(fā)酵大麥提取物（LFBE）”等相關(guān)信息可推知，表格處理方法1、2、3分別是INS．DEX．IBMX、RBE、LFBE．②根據(jù)柱形圖，分析實驗結(jié)果，說明LFBE明顯抑制3T3﹣L1前脂肪細(xì)胞分化率且隨濃度增加，抑制能力加強(qiáng)．（5）RNA經(jīng)逆轉(zhuǎn)錄過程獲得cDNA．PCR產(chǎn)物的量可以間接反映細(xì)胞中肥胖相關(guān)基因mRNA的含量．若檢測結(jié)果是 LFBE組肥胖相關(guān)基因mRNA數(shù)量明顯低于模型組和RBE組，高于空白組，則說明LFBE抑制相關(guān)基因轉(zhuǎn)錄從而抑制3T3﹣L1前脂肪細(xì)胞分化． 所以答案是：（1）選擇性（2）動物血清（可換成抗生素以防止污染） CO2（恒溫）培養(yǎng)箱（3）（高壓蒸汽）滅菌（4）①INS．DEX．IBMX、RBE、LFBE ②LFBE明顯抑制3T3﹣L1前脂肪細(xì)胞分化且隨濃度增加，抑制能力加強(qiáng)（5）逆轉(zhuǎn)錄 肥胖相關(guān)基因mRNA LFBE組肥胖相關(guān)基因mRNA數(shù)量明顯低于模型組和RBE組，高于空白組
【考點(diǎn)精析】掌握細(xì)胞分化的基礎(chǔ)和實質(zhì)和動物細(xì)胞與組織培養(yǎng)過程是解答本題的根本，需要知道在個體發(fā)育中，由一個或一種細(xì)胞增殖產(chǎn)生的后代，在形態(tài)、結(jié)構(gòu)和生理功能上發(fā)生穩(wěn)定性差異，產(chǎn)生不同的細(xì)胞類群差異的過程；細(xì)胞分化是基因選擇性表達(dá)的結(jié)果；取動物組織塊（動物胚胎或幼齡動物的器官或組織）→剪碎→用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細(xì)胞→制成細(xì)胞懸液→轉(zhuǎn)入培養(yǎng)瓶中進(jìn)行原代培養(yǎng)→貼滿瓶壁的細(xì)胞重新用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理分散成單個細(xì)胞繼續(xù)傳代培養(yǎng)．