Question

16．科學(xué)家研究發(fā)現(xiàn)絨山羊的羊絨質(zhì)量與毛角蛋白Ⅱ型中間絲（KIFⅡ）基因密切相關(guān)，獲得轉(zhuǎn)KIFⅡ基因的高絨質(zhì)絨山羊的簡單流程如圖1所示．圖2表示KIFⅡ基因與pZHZ1質(zhì)粒構(gòu)建重組質(zhì)粒的過程，A、B、C、D為四種識別切割序列完全不同的限制酶的酶切位點．已知質(zhì)粒pZHZ1的長度為3.7kb（1kb=1000對堿基），其中A～B區(qū)域長度為0.8kb，B～C區(qū)域長度為0.2kb，C～D區(qū)域長度為0.5kb．請回答下列問題：

（1）圖1中構(gòu)建的重組表達(dá)載體，目的基因的上游應(yīng)有啟動子，驅(qū)動基因的轉(zhuǎn)錄．
（2）在圖1過程③中，用促性腺激素處理以獲取更多的卵（母）細(xì)胞，這些卵（母）細(xì)胞需在體外培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期期，方可進(jìn)行過程④的操作．
（3）圖1中過程④采用的生物技術(shù)是細(xì)胞核移植，得到的重組細(xì)胞發(fā)育為早期胚胎后，可通過胚胎分割技術(shù)獲得較多胚胎．
（4）現(xiàn)分別用限制酶A、D切割圖2中重組質(zhì)粒pZHZ2樣品，結(jié)果被酶A切割成1.7kb和3.4kb兩個片段，被酶D切割成1.9kb和3.2kb兩個片段．據(jù)此判斷KIFⅡ基因大小為1.6kb，并請將目的基因內(nèi)部的酶D切割位點用相應(yīng)的字母（D）標(biāo)注在圖3中．

Answer 1

分析 分析圖1：圖中①表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建，一般將目的基因與運載體利用限制酶和DNA連接酶構(gòu)成重組質(zhì)粒；過程②表示利用動物細(xì)胞培養(yǎng)技術(shù)培養(yǎng)受體細(xì)胞；過程③為通過超數(shù)排卵的方法獲得更多的卵細(xì)胞，過程④表示細(xì)胞核移植過程．
分析圖2：圖2表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建過程．

解答 解：（1）圖1中構(gòu)建的重組表達(dá)載體，其組成包括目的基因、啟動子、終止子、標(biāo)記基因，其中目的基因的上游應(yīng)有啟動子，它是RNA聚合酶識別和結(jié)合的部位，驅(qū)動基因的轉(zhuǎn)錄．
（2）用促性腺激素可對動物進(jìn)行超數(shù)排卵處理．卵母細(xì)胞需在體外培養(yǎng)到減數(shù)第二次分裂中期才成熟．
（3）圖1中④過程采用了細(xì)胞核移植技術(shù)；來自同一個胚胎的后代具有相同的遺傳物質(zhì)，在胚胎移植時，可通過胚胎分割技術(shù)獲得更多的胚胎．
（4）已知質(zhì)粒pZHZ1的長度為3.7kb，其中BC區(qū)域長度為0.2kb，所以切去BC段后的質(zhì)粒長度為3.7-0.2=3.5kb．現(xiàn)用限制酶A、D切割重組質(zhì)粒pZHZ2樣品，結(jié)果被酶A切割成1.7kb和3.4kb兩個片段，可知重組質(zhì)粒pZHZ2的總長度為1.7+3.4=5.1kb，所以KIFⅡ基因長度為5.1-3.5=1.6kb．重組質(zhì)粒中A的切割位點距B的切割位點0.8kb，單獨用限制酶A切割后產(chǎn)生1.7kb和3.4kb兩個片段，說明在重組質(zhì)粒中除了圖中標(biāo)示出來的A酶識別位點外，還有一個A酶識別位點；D酶的酶切位點距C0.5kb，用D單獨酶切后產(chǎn)生1.9kb和3.2kb兩個片段，說明在重組質(zhì)粒中含有一個D的酶切位點，根據(jù)題中信息提示“目的基因內(nèi)部的酶D切割位點用相應(yīng)的字母（D）標(biāo)注在圖3中”，可確定在BC之間含有D的一個識別位點，D的識別位點在距B右側(cè)0.2kb處，距A右側(cè)1.0kb處，如下圖所示：．
故答案為：
（1）啟動子　       　
（2）促性腺　       減數(shù)第二次分裂中期
（3）細(xì)胞核移植　   胚胎分割
（4）1.6 kb  

點評 本題結(jié)合轉(zhuǎn)基因山羊培育過程圖，考查基因工程、細(xì)胞工程和胚胎工程的相關(guān)知識，要求考生識記所列知識要點，能準(zhǔn)確判斷圖中各過程的名稱，并能在較簡單的情境中使用，屬于考綱識記層次的考查．