Question

【題目】回答下列有關(guān)果膠酶生產(chǎn)及固定化應(yīng)用的問題：

（1）菌種篩選：為了獲得高產(chǎn)果膠酶的菌株，用射線處理一些霉菌后，稀釋并接種在____________果膠為唯一碳源的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，此培養(yǎng)基的pH要求___________。

（2）菌種鑒定：通過在____________（物理性質(zhì)）培養(yǎng)基上觀察____________，實現(xiàn)菌種的鑒定。

（3）果膠酶的固定化：取磁性殼聚糖微球固體顆粒，加入果膠酶溶液，30℃條件下振蕩lh后裝柱，上述固定化果膠酶的方法屬于____________。反應(yīng)柱使用后要用____________洗滌，放置于____________保存。

（4）果膠酶活力測定：以lg果膠酶單位時間催化產(chǎn)生的主要產(chǎn)物____________的量計算酶的活力。已知3、5——二硝基水楊酸與果膠水解主要產(chǎn)物共熱，能產(chǎn)生棕紅色的氨基化合物，在一定范圍內(nèi)產(chǎn)物的量和反應(yīng)液顏色深淺成正比，可用_________________法測定產(chǎn)物的量。此方法需要制作標準曲線，其中縱坐標一般為____________。

Answer 1

【答案】低濃度 中性、偏酸 固體 菌落的形態(tài)特征 吸附法 10倍體積蒸餾水 4℃（冰箱） 半乳糖醛酸 光電比色 光密度值（OD值）

【解析】

1、用射線處理一些霉菌后，稀釋并接種在低濃度果膠為唯一碳源的培養(yǎng)基中培養(yǎng)可以獲得高產(chǎn)果膠酶的菌株，

2、磁性殼聚糖微球表面的氨基可以與蛋白質(zhì)分子的羧基反應(yīng)，從而將蛋白質(zhì)分子吸附固定，因此該方法固定化果膠酶利用的是吸附法。實驗裝置中，30℃條件下震蕩1h，裝入圖所示的反應(yīng)柱中，需要用蒸餾水洗去未固定的游離果膠酶，然后放置在4℃冰箱中保存。

3、酶的活性是指酶催化一定化學(xué)反應(yīng)的能力，酶活性的高低可以用在一定條件下，酶所催化的某一化學(xué)反應(yīng)的反應(yīng)速度來表示。

4、果膠酶水解果膠主要生成半乳糖醛酸，以1g果膠酶單位時間內(nèi)催化產(chǎn)生的半乳糖醛酸的量計算酶的活力。此方法需要制作標準曲線，該標準曲線的橫坐標應(yīng)該是半乳糖醛酸的含量，縱坐標一般為光密度值（OD值）。

（1）菌種篩選：為了獲得高產(chǎn)果膠酶的菌株，用射線處理一些霉菌后，稀釋并接種在低濃度果膠為唯一碳源的培養(yǎng)基中培養(yǎng)，此培養(yǎng)基的pH要求中性偏酸。

（2）菌種鑒定：通過在固體物理性質(zhì)）培養(yǎng)基上觀察菌落的形態(tài)特征，實現(xiàn)菌種的鑒定。

（3）果膠酶的固定化：取磁性殼聚糖微球固體顆粒，加入果膠酶溶液，30℃條件下振蕩lh后裝柱，上述固定化果膠酶的方法屬于吸附法。反應(yīng)柱使用后要用10倍體積蒸餾水洗滌，放置于4℃（冰箱）保存。

（4）果膠酶活力測定：以lg果膠酶單位時間催化產(chǎn)生的主要產(chǎn)物半乳糖醛酸的量計算酶的活力。己知3、5——二硝基水楊酸與果膠水解主要產(chǎn)物共熱，能產(chǎn)生棕紅色的氨基化合物，在一定范圍內(nèi)產(chǎn)物的量和反應(yīng)液顏色深淺成正比，可用光電比色法測定產(chǎn)物的量。此方法需要制作標準曲線，其中縱坐標一般為光密度值（OD值）。