Question

【題目】如圖所示為農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法示意圖。請(qǐng)回答以下問(wèn)題：

（1）圖中①過(guò)程用到的工具酶的特點(diǎn)是_________________________________。下列所示的黏性末端是由_______種限制性核酸內(nèi)切酶作用產(chǎn)生的。

（2）圖中②過(guò)程用到的工具酶是___________，該過(guò)程是基因工程最核心的步驟，即____________。

（3）圖中④過(guò)程的原理是___________。

（4）檢驗(yàn)基因工程是否成功。首先應(yīng)檢測(cè)___________，這是外源基因能否在真核細(xì)胞內(nèi)___________的關(guān)鍵；其次，利用___________法檢測(cè)目的基因是否轉(zhuǎn)錄出相應(yīng)的mRNA；最后，利用抗原一抗體雜交法檢測(cè)目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)。

Answer 1

【答案】能識(shí)別特定的脫氧核苷酸序列并且在特定位點(diǎn)切割DNA分子4DNA連接酶基因表達(dá)載體的構(gòu)建植物細(xì)胞的全能性轉(zhuǎn)基因生物的染色體上是否插入外源基因穩(wěn)定遺傳分子雜交

【解析】

（1）圖中①過(guò)程所用的酶為限制酶，其特點(diǎn)是能識(shí)別特定的脫氧核苷酸序列并且在特定位點(diǎn)切割DNA分子。圖中四個(gè)黏性末端各不相同，根據(jù)限制酶的特異性可知，這四種黏性末端是由四種不同的限制酶切割形成的。

（2）圖中②過(guò)程是將黏性末端連接，形成重組質(zhì)粒，需要DNA連接酶，基因工程的核心步驟是基因表達(dá)載體的構(gòu)建。

（3）圖中④過(guò)程是利用植物組織培養(yǎng)將外植體培養(yǎng)成植株的過(guò)程，原理是植物細(xì)胞具有全能性。

（4）基因工程是否成功,需要進(jìn)行檢測(cè)，其中分子水平的檢測(cè)：第一步:轉(zhuǎn)基因生物的DNA上是否插入了目的基因，方法:DNA分子雜交技術(shù)，這是看外源基因能否在真核細(xì)胞內(nèi)穩(wěn)定遺傳的關(guān)鍵，第二步:目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA，方法:分子雜交技術(shù)，第三步:目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)，方法:從轉(zhuǎn)基因生物中提取蛋白質(zhì),用相應(yīng)的抗體進(jìn)行抗原-抗體雜交。