Question

【題目】血液作為一種常見的臨床檢測(cè)材料，如何從血液中快速、高效地分離和提取基因組DNA，對(duì)于臨床血液檢驗(yàn)與分析非常重要，科研人員對(duì)比分析了超聲波處理法（方法A）、高鹽法（方法B）、改良高鹽法（方法C）等三種快速提取大鼠全血基因組DNA的方法，實(shí)驗(yàn)過程如圖，請(qǐng)分析回答：

（1）常規(guī)細(xì)胞破碎方法是 _____________。三種方法實(shí)驗(yàn)所需時(shí)間均較短，主要在樣品處理和細(xì)胞破碎環(huán)節(jié)進(jìn)行了優(yōu)化，就三種方法而言，細(xì)胞破碎較理想的方法為___________

（2）方法B得到的溶液中RNA含量高于DNA，分析原因可能是___________。

（3）步驟②中加入NaCl的目的是________

（4）得到含DNA的溶液后進(jìn)行鑒定，需向其中加入________沸水浴加熱冷卻后變藍(lán)。

Answer 1

【答案】加入蒸餾水，使細(xì)胞吸水漲破 方法C 加入的蛋白酶抑制了RNA酶的活性 溶解DNA 二苯胺

【解析】

分析圖：提取基因組DNA的步驟是：①方法A（超聲波處理法）、B（高鹽法）、C（改良高鹽法）均可破碎細(xì)胞，細(xì)胞破碎后，DNA存在于上清液中；②取上清液加入NaCl，震蕩充分使DNA充分溶解；③取上清液，再加異丙醇，使DNA沉淀析出；④為進(jìn)一步除去雜質(zhì)，取沉淀加無(wú)水乙醇，去鹽，過濾，最后得到含DNA的沉淀。

（1）常規(guī)細(xì)胞破碎方法是加入蒸餾水，使細(xì)胞吸水漲破，圖中三種破碎細(xì)胞的方法中，方法C與方法A、B相比，破碎細(xì)胞的效率高、成本低，是細(xì)胞破碎較理想的方法。

（2）方法B得到的溶液中RNA含量高于DNA，其原因可能是蛋白酶K的加入抑制了RNA酶的活性。

（3）步驟②中加入NaCl的目的是充分溶解DNA，以便步驟③中加入異丙醇使DNA析出。

（4）得到含DNA的溶液后進(jìn)行鑒定，需向其中加入二苯胺，沸水浴加熱，冷卻后變藍(lán)。