Question

【題目】微生物的分離、培養(yǎng)和計數(shù)是現(xiàn)代生物工程應用中的重要環(huán)節(jié)。圖示為大腸桿菌分離和培養(yǎng)過程中部分操作示意圖。請分析回答下列問題。

（1）實驗過程中對培養(yǎng)皿和實驗操作者的雙手所采用的滅菌或消毒方法依次是______、_______。

（2）培養(yǎng)大腸桿菌時，在接種前需要檢測培養(yǎng)基是否被污染。對于固體培養(yǎng)基應采用的檢測方法是___________。

（3）圖示是利用____________法進行微生物接種，把聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。在灼燒接種環(huán)之后，要等其冷卻后再進行劃線的原因是____________。

（4）關于圖示的操作方法和結果正確的是___________。

A．操作前要將接種環(huán)放在火焰邊灼燒滅菌

B．劃線操作須在火焰上進行

C．在5區(qū)域中才可以得到所需菌落

D．在12345區(qū)域中劃線前后都要對接種環(huán)滅菌

（5）若要培養(yǎng)具有耐高糖和耐酸特性的酵母菌，制備選擇培養(yǎng)基時在基本培養(yǎng)基的基礎上需要__________。

Answer 1

【答案】干熱滅菌 化學消毒 將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生 平板劃線 以免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種 D 添加高濃度蔗糖(葡萄糖)和調(diào)低pH（或高糖和酸性的篩選環(huán)境）

【解析】

無菌操作技術有消毒和滅菌，消毒有煮沸消毒法、巴氏消毒法和化學藥劑消毒法，滅菌有灼燒滅菌法（適用于接種工具）、干熱滅菌法（適用于玻璃器皿和金屬工具）、高壓蒸汽滅菌法（適用于培養(yǎng)基及容器的滅菌）。題圖中使用劃線分離法和稀釋涂布分離法分離大腸桿菌，利用平板劃線法接種，需要注意的是接種環(huán)在劃線時每次劃線前要灼燒，冷卻后從上一區(qū)劃線末端開始劃，劃線首尾區(qū)不重疊；稀釋涂布法是將菌液進行一系列的梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，在適宜條件下培養(yǎng)，在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成單個細胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落。

（1）實驗過程中對培養(yǎng)皿和實驗操作者的雙手所采用的滅菌或消毒方法依次是干熱滅菌、化學消毒。

（2）檢測固體培養(yǎng)基是否被污染應采用的檢測方法是將未接種的培養(yǎng)基在適宜的溫度下放置適宜的時間，觀察培養(yǎng)基上是否有菌落產(chǎn)生。

（3）據(jù)圖可知，圖示是利用平板劃線法進行微生物接種，把聚集的菌種逐步稀釋分散到培養(yǎng)基的表面。在灼燒接種環(huán)之后，要等其冷卻后再進行劃線，原因是以免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種。

（4）劃線的順序為12345，操作前要將接種環(huán)放在火焰上灼燒滅菌，劃線操作須在火焰旁進行，在12345區(qū)域中劃線前后都要對接種環(huán)滅菌，在5個區(qū)域中都有可能得到菌落，故D正確。

（5）若要培養(yǎng)具有耐高糖和耐酸特性的酵母菌，制備選擇培養(yǎng)基時在基本培養(yǎng)基的基礎上需要添加高濃度蔗糖(葡萄糖)和調(diào)低pH（或高糖和酸性的篩選環(huán)境）。