Question

轉(zhuǎn)基因大米可幫助人們補(bǔ)充每天必須的維生素A，由于其含有可以生成維生素A的B-胡蘿卜素，呈金黃色澤，故稱“金色大米”“金色大米”的培育流程如圖，請回答下列問題（已知限制性核酸內(nèi)切酶Ⅰ的識別序列和切點(diǎn)是-G↓GATCC-，限制性核酸內(nèi)切酶Ⅱ的識別序列和切點(diǎn)是-↓GATC-）
（1）圖中a、b所示獲得目的基因的方法是

 

．
（2）據(jù)圖分析，在構(gòu)建c的過程中，需用

 

切割目的基因，為檢驗(yàn)重組質(zhì)粒是否導(dǎo)入受體細(xì)胞，需要利用的標(biāo)記基因是

 

．
（3）過程e運(yùn)用了細(xì)胞工程中的

 

技術(shù)，新個(gè)體是否符合要求，在個(gè)體水平上檢測

 

．

Answer 1

考點(diǎn)：基因工程的原理及技術(shù)

專題：

分析：分析圖解：圖中a表示轉(zhuǎn)錄過程，b表示利用mRNA進(jìn)行逆轉(zhuǎn)錄合成目的基因，c表示基因表達(dá)載體的構(gòu)建，d表示目的基因?qū)�入受體細(xì)胞，e是水稻細(xì)胞進(jìn)行植物的組織培養(yǎng)并篩選出符合要求的植株．

解答： 解：（1）圖中a表示轉(zhuǎn)錄過程，b表示逆轉(zhuǎn)錄，因此可以看出圖中a、b所示表示通過逆轉(zhuǎn)錄法獲得目的基因．
（2）據(jù)圖分析，酶I的識別序列和切點(diǎn)是一G↓GATCC一，酶II的識別序列和切點(diǎn)是一↓GATC-，若用限制酶Ⅱ切割運(yùn)載體會將兩個(gè)標(biāo)記基因都破壞，因此只能用限制酶I切割目的基因．圖中可以看出目的基因插入到基因Ⅱ中，因此檢驗(yàn)重組載體導(dǎo)入能否成功，需要利用基因I作為標(biāo)記基因．
（3）過程e將轉(zhuǎn)基因水稻細(xì)胞培養(yǎng)成完整植株還需采用植物組織培養(yǎng)技術(shù)．新個(gè)體是否符合要求，在個(gè)體水平上檢測大米中是否含有可以生成維生素A的β-胡蘿卜素．
故答案為：
（1）反轉(zhuǎn)錄法
（2）限制性核酸內(nèi)切酶Ⅰ基因Ⅰ
（3）植物組織培養(yǎng)　大米中是否含有可以生成維生素A的β-胡蘿卜素

點(diǎn)評：本題具有一定的綜合性，難度適中，考查基因工程中目的基因的獲取、基因表達(dá)載體的構(gòu)建、限制酶、植物組織培養(yǎng)技術(shù)、蛋白質(zhì)工程等方面的知識，要求考生能識記基因工程技術(shù)的操作步驟，以及限制酶的作用特點(diǎn)，培養(yǎng)了考生識圖能力和審題能力．