Question

【題目】檢測轉(zhuǎn)基因(CP4基因)大豆的基本流程如下，下列有關(guān)說法錯誤的是（ ）

大豆DNA的提取和純化→擴增靶基因(CP4基因)→結(jié)果觀察與鑒定

A.采用吸水漲破法破裂細胞，提取DNA

B.利用溶解度的差異，將DNA與雜質(zhì)分離

C.擴增靶基因，需要設(shè)計特異性引物

D.結(jié)果鑒定需要以非轉(zhuǎn)基因大豆作對照進行分析

Answer 1

【答案】A

【解析】

1.DNA粗提取和鑒定的原理：①DNA的溶解性：DNA和蛋白質(zhì)等其他成分在不同濃度NaCl溶液中溶解度不同；DNA不溶于酒精溶液，但細胞中的某些蛋白質(zhì)溶于酒精；DNA對酶、高溫和洗滌劑的耐受性．②DNA的鑒定：在沸水浴的條件下，DNA遇二苯胺會被染成藍色。

2.PCR擴增反應需要兩種引物、模板DNA、原料（4種脫氧核苷酸），酶（耐高溫的DNA聚合酶）。

3.目的基因的檢測與鑒定：（1）分子水平上的檢測：①檢測轉(zhuǎn)基因生物染色體的DNA是否插入目的基因--DNA分子雜交技術(shù)； ②檢測目的基因是否轉(zhuǎn)錄出了mRNA--分子雜交技術(shù)； ③檢測目的基因是否翻譯成蛋白質(zhì)--抗原-抗體雜交技術(shù)。（2）個體水平上的鑒定：抗蟲鑒定、抗病鑒定、活性鑒定等。

A、大豆是植物細胞，由于細胞壁的存在，不會吸水漲破，通常采用機械研磨的方法破碎植物的組織和細胞，而動物細胞采用滲透作用吸水的方法，使動物細胞吸水漲破，釋放核物質(zhì)，A錯誤；

B、利用DNA與雜質(zhì)在氯化鈉溶液和酒精中溶解度的差異，可以將它們分離，B正確；

C、擴增靶基因，需要耐高溫的DNA聚合酶，還需要設(shè)計特異性引物，C正確；

D、結(jié)果鑒定可利用轉(zhuǎn)基因大豆基因做出的探針，通過DNA分子雜交檢測靶基因，該過程中以非轉(zhuǎn)基因大豆作為對照，使得結(jié)果具有說服力，D正確。

故選A。