Question

16．利用紫外線誘變選育高產(chǎn)β-胡蘿卜素的三孢布拉霉負(fù)菌，未突變菌不能在含有濃度為10^-5M的β-紫羅酮的培養(yǎng)基上生長．該菌是含多個(gè)細(xì)胞核的單細(xì)胞真菌，菌體隨β-胡蘿卜素含量增加從黃色加深至橙紅色．圖甲為選育及提取獲得β-胡蘿卜素流程．

（1）三孢布拉霉負(fù)菌與細(xì)菌共同具有的細(xì)胞器是核糖體．過程①的原理是基因突變．
（2）培養(yǎng)基中的葡萄糖含量對(duì)菌體生長影響最大，葡萄糖為菌體生長提供碳源（碳源和能源），為選出高產(chǎn)突變菌種，還應(yīng)在培養(yǎng)基中添加10^-5M的β━紫羅酮，該培養(yǎng)基按用途分是選擇培養(yǎng)基．
（3）進(jìn)行③過程時(shí)，應(yīng)選取橙紅色的菌落接種至液體培養(yǎng)基．為篩選純化β━胡蘿卜素產(chǎn)量高的菌種，⑤中采取重復(fù)③④過程（填過程中的數(shù)字）．
（4）某同學(xué)進(jìn)行過程乙的正確操作，平板經(jīng)培養(yǎng)后的菌落分布如圖乙所示．該同學(xué)的接種方法是稀釋涂布平板法；只有少數(shù)菌能生長形成菌落的原因是基因突變頻率低，只有少數(shù)基因突變的菌才能生長、繁殖．
（5）稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)：若將稀釋10⁵倍的某細(xì)菌菌液，用稀釋涂布平板法進(jìn)行計(jì)數(shù)．在五個(gè)固體培養(yǎng)基上分別接種0.1ml該細(xì)菌菌液，適宜條件下培養(yǎng)一段時(shí)間后，培養(yǎng)基上的菌落數(shù)分別為：20、40、152、154、156，則每升菌液中細(xì)菌數(shù)量為1.255×10¹¹個(gè)．

Answer 1

分析 分析圖甲：圖中過程①表示利用紫外線誘導(dǎo)基因突變，過程②表示微生物接種（結(jié)合圖乙可知，平板中的菌落均勻分布，應(yīng)采用了稀釋涂布平板法），過程③④表示選擇培養(yǎng)，過程⑥表示濃縮．

解答 解：（1）三孢布拉霉負(fù)菌為真核細(xì)胞，細(xì)菌為原核細(xì)胞，它們共同具有的細(xì)胞器是核糖體．過程①中有紫外線照射可誘導(dǎo)基因突變．
（2）培養(yǎng)基中的葡萄糖為菌體生長提供碳源（碳源和能源）；由于未突變菌不能在含有濃度為10^-5M的β━紫羅酮的培養(yǎng)基上生長，所以為選出高產(chǎn)突變菌種，還應(yīng)在培養(yǎng)基中添加10^-5M的β━紫羅酮，屬于選擇培養(yǎng)基．
（3）菌體隨β━胡蘿卜素含量增加從黃色加深至橙紅色，所以進(jìn)行③過程時(shí)，應(yīng)選取橙紅色的菌落接種至液體培養(yǎng)基．為篩選純化β━胡蘿卜素產(chǎn)量高的菌種，采取重復(fù)③④過程．
（4）固體平板培養(yǎng)基經(jīng)過程②接種培養(yǎng)后的菌落分布如圖乙所示，所以該同學(xué)的接種方法是稀釋涂布平板法；只有少數(shù)菌能生長形成菌落的根本原因是基因突變頻率低，只有少數(shù)基因突變的菌才能生長、繁殖．
（5）稀釋涂布平板法計(jì)數(shù)：若將稀釋10⁵倍的某細(xì)菌菌液，用稀釋涂布平板法進(jìn)行計(jì)數(shù)．在五個(gè)固體培養(yǎng)基上分別接種0.1ml該細(xì)菌菌液，適宜條件下培養(yǎng)一段時(shí)間后，培養(yǎng)基上的菌落數(shù)分別為：20、40、152、154、156，為了保證結(jié)果準(zhǔn)確，一般選擇菌落數(shù)在30～300的平板進(jìn)行計(jì)數(shù)，則每升菌液中細(xì)菌數(shù)量為$\frac{40+152+154+156}{4}{×10}^{5}×\frac{1}{0.1}{×10}^{3}$=1.255×10¹¹個(gè)．
故答案為：
（1）核糖體      基因突變
（2）碳源（碳源和能源）    10^-5M的β━紫羅酮   選擇
（3）橙紅     ③④
（4）稀釋涂布平板法         基因突變頻率低，只有少數(shù)基因突變的菌才能生長、繁殖
（5）1.255×10¹¹

點(diǎn)評(píng) 本題考查了誘變育種、微生物的分離與培養(yǎng)以及微生物計(jì)數(shù)的有關(guān)知識(shí)，要求考生識(shí)記誘變育種的方法及原理；識(shí)記接種微生物常用的兩種方法；掌握微生物的計(jì)數(shù)方法，能結(jié)合所學(xué)的知識(shí)準(zhǔn)確答題．