【題目】下圖1表示含有目的基因D的DNA片段及其中部分堿基序列,圖2表示一種質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)和部分堿基序列,F(xiàn)有Mps、BamH、Mbo、Sma4種限制性核酸內(nèi)切酶。它們識(shí)別的堿基序列和酶切位點(diǎn)分別為CCGG、GGATCC、GATC、CCCGGG,F(xiàn)要培育含目的基因D的大腸桿菌,請回答下列問題:

1為了提高試驗(yàn)成功率,需要通過PCR纊增目的基因,以獲得目的基因的大量拷貝,該過程除需目的基因和dNTP 包括dATP、dGTP, dCTP、dTTP之外還需提供______________。

2圖2中,啟動(dòng)子的作用是______________

3分別用4種限制酶切割圖1中的DNA片段,能形成黏性末端的是______________。

4若將圖2中質(zhì)粒和目的基因D通過同種限制酶處理后進(jìn)行連接,形成重組質(zhì)粒,那么應(yīng)選用的限制酶是___________。為了提高重組質(zhì)粒導(dǎo)入大腸桿菌的成功率,需將大腸桿菌用___________進(jìn)行處理。

5為了篩選出成功導(dǎo)入含目的基因D的重組質(zhì)粒的大腸桿菌,首先將大腸桿菌圖3所示的培養(yǎng)基上培養(yǎng),得到如圖3的菌落。再將滅菌絨布按到培養(yǎng)基上,使絨布面沾上菌落,然后將絨布按到圖4所示的培養(yǎng)基上培養(yǎng),得到如圖4的結(jié)果空圈表示與圖3對照無菌落的位置。請推測:圖3培養(yǎng)基里含的抗生素是_ _,

圖4中生長的大腸桿菌中是否有目的基因D?______________。

【答案】1熱穩(wěn)定的DNA聚合酶Taq酶和引物

2與RNA聚合酶結(jié)合,驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA

3Msp、BamH、Mbo

4BamH Ca2+

5抗生素B 抗生素A 不含

【解析】1PCR反應(yīng)條件有:目的基因、緩沖溶液,以及熱穩(wěn)定的DNA聚合酶Taq酶和引物。

2啟動(dòng)子的作用是與RNA聚合酶結(jié)合,驅(qū)動(dòng)基因轉(zhuǎn)錄出mRNA。

3Sma識(shí)別的序列為GGGCCC,切割會(huì)產(chǎn)生平末端,其他的酶Msp、BamH、Mbo都能產(chǎn)生粘性末端。

4由圖1可知,目的基因兩側(cè)是GGATCC序列,該序列是限制酶BamH的識(shí)別序列,因此要將質(zhì)粒和目的基因D連接形成重組質(zhì)粒,應(yīng)選用限制酶BamH切割。

5用限制酶BamH切割質(zhì)粒后,用限制酶BamH切割破壞了抗生素A抗性基因,但沒有破環(huán)抗生素B抗性基因,因此首先用含有抗生素B的培養(yǎng)基培養(yǎng)大腸桿菌,能生存下來的是含有普通質(zhì)粒和重組質(zhì)粒的大腸桿菌;再用含有抗生素A的培養(yǎng)基培養(yǎng),能生存下來的是含有普通質(zhì)粒的大腸桿菌最后能在培養(yǎng)皿1上生存,但不能在培養(yǎng)皿2上生存的大腸桿菌菌落進(jìn)行培養(yǎng),即可得到含重組質(zhì)粒的大腸桿菌圖3中空心圈在圖2中對應(yīng)的位置是含目的基因的重組質(zhì)粒的大腸桿菌的菌落。

練習(xí)冊系列答案
相關(guān)習(xí)題

科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】下列關(guān)于細(xì)胞結(jié)構(gòu)與功能的敘述錯(cuò)誤的是

A. 心肌細(xì)胞中的線粒體數(shù)量較多,與細(xì)胞消耗能量較多有關(guān)

B. 成熟植物細(xì)胞通過滲透作用吸水,與液泡、細(xì)胞膜等結(jié)構(gòu)有關(guān)

C. 核膜上的核孔便于細(xì)胞核和細(xì)胞質(zhì)之間交流大分子物質(zhì)

D. 原核細(xì)胞都具有細(xì)胞膜、細(xì)胞質(zhì),但沒有核膜和細(xì)胞器

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科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】下列有關(guān)原核細(xì)胞和真核細(xì)胞的敘述,正確的是

A. 兩種細(xì)胞具有相似的細(xì)胞膜和細(xì)胞質(zhì)

B. 兩種細(xì)胞的細(xì)胞核中都存在著染色體

C. 二者的細(xì)胞核與細(xì)胞質(zhì)的邊界為核膜

D. 二者的細(xì)胞膜外面都存在著細(xì)胞壁

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科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】科學(xué)家用含有14C的CO2來追蹤光合作用中的碳原子,其轉(zhuǎn)移途徑是

A. CO2→葉綠素→ADP B. CO2→葉綠體→ATP

C. CO2→乳酸→糖類 D. CO2→C3→糖類

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科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】正常細(xì)胞內(nèi)K濃度約為細(xì)胞外的30倍,細(xì)胞外Na濃度約為細(xì)胞內(nèi)的12倍。當(dāng)細(xì)胞內(nèi)外的Na濃度差、K濃度差減小時(shí),細(xì)胞膜上的Na/KATP酶發(fā)揮作用,這種酶可以通過水解ATP,將細(xì)胞內(nèi)的Na移出膜外,將細(xì)胞外的K移入膜內(nèi)。如下圖1所示:

1)膜內(nèi)外Na具有濃度差,與膜的____________性有關(guān)。Na/KATP酶將細(xì)胞內(nèi)的Na移出膜外的跨膜運(yùn)輸方式是______________。

2)在運(yùn)輸NaK的過程中,Na/KATP酶的___________發(fā)生改變,有利于與離子的結(jié)合與分離。

3)比較圖2和圖3,當(dāng)NaK________濃度差流過Na/KATP酶時(shí),將ADP合成ATP,說明進(jìn)行ATP合成或分解的反應(yīng)條件取決于__________________。

4)生物膜系統(tǒng)的分隔作用及能量是維系細(xì)胞有序性的基礎(chǔ),線粒體內(nèi)膜上主要完成類似圖________(填編號)的過程。

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科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】下列敘述不正確的是( )

A. 基因在染色體上呈線性排列,染色體是基因的主要載體

B. 基因是有遺傳效應(yīng)的DNA片段,一個(gè)DNA分子上有很多個(gè)基因

C. 一條染色體上只有一個(gè)DNA分子

D. 一個(gè)基因含有許多個(gè)脫氧核苷酸,基因的特異性是由脫氧核苷酸的排列順序決定的

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科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】在細(xì)胞的生命歷程中,會(huì)出現(xiàn)分裂、分化等現(xiàn)象。下列敘述錯(cuò)誤的是

A細(xì)胞的有絲分裂對生物性狀的遺傳有貢獻(xiàn)

B哺乳動(dòng)物的造血干細(xì)胞是未經(jīng)分化的細(xì)胞

C細(xì)胞分化是細(xì)胞內(nèi)基因選擇性表達(dá)的結(jié)果

D通過組織培養(yǎng)可將植物葉肉細(xì)胞培育成新的植株

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科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】下圖1表示的是科學(xué)家把4個(gè)與胚胎發(fā)育相關(guān)的特異性基因?qū)氤赡晷∈蠹?xì)胞,培養(yǎng)出了誘導(dǎo)多潛能干細(xì)胞,稱為iPS細(xì)胞,類似于胚胎干細(xì)胞樣細(xì)胞,再將iPS細(xì)胞轉(zhuǎn)入小鼠乙體內(nèi)培養(yǎng),結(jié)果如圖所示。圖2表示研究人員利用小鼠獲取單倍體胚胎干細(xì)胞的一種方法。請分析并回答下列問題:

1胚胎干細(xì)胞在形態(tài)上,表現(xiàn)為______________;在功能上,具有______________。

2克隆培養(yǎng)iPS細(xì)胞時(shí),為了防止雜菌感染,需在培養(yǎng)液中加入一定量的_______________。早期研究發(fā)現(xiàn)在iPS細(xì)胞誘導(dǎo)培養(yǎng)的過程中會(huì)出現(xiàn)大量不具備干細(xì)胞功能的細(xì)胞,若用維生素C處理,能顯著提高iPS細(xì)胞的誘導(dǎo)成功率,推測其原因可能是______________。

3研究人員將iPS細(xì)胞團(tuán)注射入缺乏T細(xì)胞的小鼠體內(nèi),細(xì)胞團(tuán)能繼續(xù)生長。由此可推測圖1中iPS細(xì)胞團(tuán)逐漸退化的原因是________________。

4圖2中,研究人員需要對實(shí)驗(yàn)小鼠丙注射____________使其超數(shù)排卵,從而獲得更多的卵母細(xì)胞,再利用SrCl2溶液處理、激活卵母細(xì)胞,并在體外培養(yǎng)至[]____________期,再利用流式細(xì)胞儀篩選出單倍體細(xì)胞。

5研究發(fā)現(xiàn),單倍體胚胎干細(xì)胞也能分化,形成不同功能的細(xì)胞、組織和器官,該技術(shù)培育的單倍體動(dòng)物可成為研究______________顯性隱性基因功能的理想細(xì)胞模型。

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科目:高中生物 來源: 題型:

【題目】如圖表示光照強(qiáng)度和CO2濃度對某植物光合作用強(qiáng)度的影響。下列有關(guān)敘述中錯(cuò)誤的是

A. 曲線中a點(diǎn)轉(zhuǎn)向b點(diǎn)時(shí),葉綠體中C3濃度降低

B. bc段影響光合作用速率的限制性因素可能是溫度等其它條件

C. ab段影響光合作用速率的主要因素是光照強(qiáng)度

D. 曲線中d點(diǎn)轉(zhuǎn)向b點(diǎn)時(shí),葉綠體中C5濃度升高

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