Question

【題目】乳酸菌指發(fā)酵糖類主要產(chǎn)物為乳酸的一類革蘭氏陽(yáng)性細(xì)菌的總稱，經(jīng)革蘭氏染色后呈紫色。分離乳酸菌常用MRS固體培養(yǎng)基：蛋白胨5 g、牛肉膏5 g、酵母提取物2.5 g、檸檬酸二銨1 g、水500 mL、乙酸鈉2.5 g、K2HPO41 g、MnSO4·4H2O0.125 g、瓊脂12.5 g、MgSO4·H2O0.29 g、CaCO35 g、葡萄糖10 g。請(qǐng)回答：

（1）從MRS固體培養(yǎng)基成分可以看出乳酸菌喜________（填“葷”或“素”）。MRS培養(yǎng)基需要用高壓蒸汽滅菌法滅菌，滅菌時(shí)設(shè)置的壓力和時(shí)間分別為________g/cm2、__________min。

（2）若用革蘭氏染色法對(duì)大腸桿菌進(jìn)行染色，結(jié)果____（填“是”或“否”）呈紫色。

（3）不僅可以制備固定化酶，還可以制備固定化細(xì)胞。用乳酸菌制作酸乳時(shí)，可對(duì)乳酸菌進(jìn)行固定化處理，方法為：稱取適量海藻酸鈉配成水溶液，加入乳酸菌并攪拌均勻，以一定速度滴入CaCl2溶液中形成凝膠，使其凝固成珠狀。上述采用的固定方法是__________。

（4）乳酸菌可用于泡菜制作。在對(duì)泡菜作亞硝酸鹽定量檢測(cè)時(shí)，若樣液測(cè)定時(shí)的比色杯光程小于制作標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)的比色杯光程，則測(cè)得的樣液中亞硝酸鹽含量__________（填“偏大”“偏小”或“不影響”）；若泡菜樣液測(cè)得的OD值過大，超出標(biāo)準(zhǔn)曲線，則最適宜的做法是__________。

Answer 1

【答案】葷 500 30 否 包埋法 偏小 對(duì)樣品溶液進(jìn)行適當(dāng)稀釋

【解析】

固定化酶和固定化細(xì)胞是利用物理或化學(xué)方法將酶或細(xì)胞固定在一定空間內(nèi)的技術(shù)，包括包埋法、化學(xué)結(jié)合法和物理吸附法。細(xì)胞個(gè)體大，難以被吸附或結(jié)合，多采用包埋法固定化。

測(cè)定亞硝酸鹽含量時(shí)的標(biāo)準(zhǔn)曲線制作方法：①取0、0.5、3.0和5.0 mL亞硝酸鈉標(biāo)準(zhǔn)溶液，分別放在25 mL容量瓶中，各加入4.5mL氯化銨緩沖液、2.5 mL60%乙酸溶液和5mL顯色劑，加水定容，混合均勻，暗處理25min；②用光程1 cm的比色杯在550 nm處分別測(cè)定光密度值（OD值）；③以亞硝酸鈉質(zhì)量為橫坐標(biāo)，以光密度為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。

（1）由MSR培養(yǎng)基成分中含有牛肉膏、蛋白胨等可知，乳酸菌喜葷。利用高壓蒸汽滅菌法對(duì)培養(yǎng)基滅菌時(shí)，設(shè)置的壓力和時(shí)間分別為500 g/cm2、30 min。

（2）大腸桿菌是革蘭氏陰性細(xì)菌，用革蘭氏染色法對(duì)大腸桿菌進(jìn)行染色，結(jié)果不會(huì)呈現(xiàn)紫色。

（3）分析題文描述可知，對(duì)乳酸菌這類細(xì)胞進(jìn)行固定化處理，采用的是包埋法。

（4）在對(duì)泡菜制作過程中的亞硝酸鹽定量檢測(cè)時(shí)，若樣液測(cè)定時(shí)的比色杯光程小于制作標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)的比色杯光程，則測(cè)得的樣液中亞硝酸鹽含量偏小。若泡菜樣液測(cè)得的OD值過大，超出標(biāo)準(zhǔn)曲線，則最適宜的做法是對(duì)樣品溶液進(jìn)行適當(dāng)稀釋后再次測(cè)定。