Question

9．農(nóng)作物收獲后，燃燒秸稈會(huì)造成大氣污染，如何回收利用是我國(guó)面臨的一個(gè)重要問(wèn)題．某同學(xué)設(shè)計(jì)從土壤中分離纖維素分解菌→分解秸稈，獲得糖液→發(fā)酵生產(chǎn)乙醇，從而實(shí)現(xiàn)再次利用，請(qǐng)回答以下問(wèn)題：
（1）將從土壤中獲得的微生物培養(yǎng)在以纖維素為碳源，并在加入剛果紅的培養(yǎng)基上篩選周圍有透明圈的菌落．
（2）純化菌種時(shí)，為了得到單菌落，常采用的接種方法有兩種，即平板劃線法和稀釋涂布平板法．采用固體平板培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)，需要倒置培養(yǎng)，其原因是防止皿蓋上凝結(jié)的水珠滴落在培養(yǎng)基上污染培養(yǎng)基．
（3）發(fā)酵階段需要的菌種是酵母菌，在產(chǎn)生乙醇時(shí)要控制的必要條件是無(wú)氧（密閉或密封）．

Answer 1

分析 1、剛果紅染色法特指纖維素的染色法，剛果紅能與纖維素形成紅色復(fù)合物，對(duì)纖維二糖和葡萄糖無(wú)作用；在含有纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅，剛果紅能與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后，剛果紅-纖維素的復(fù)合物就無(wú)法生形成，培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈，可用此來(lái)鑒別纖維素或纖維素分解菌的分解作用．
2、分離纖維素分解菌的實(shí)驗(yàn)流程是：土壤取樣→選擇培養(yǎng)→梯度稀釋→將樣品涂布到鑒別纖維素分解菌的培養(yǎng)基上→挑選產(chǎn)生透明圈的菌落．
3、纖維素酶是一種復(fù)合酶，一般認(rèn)為它至少含有三種組分，即C₁酶、C_x酶、葡萄糖苷酶，前兩種酶使纖維素分解成纖維二糖，第三種酶將纖維二糖分解成葡萄糖．
4、酵母菌在酒精發(fā)酵時(shí)一般將溫度控制在18-25℃，需要進(jìn)行無(wú)氧發(fā)酵．

解答 解：（1）篩選纖維素分解菌時(shí)需要使用以纖維素為唯一碳源的選擇培養(yǎng)基．鑒定纖維素分解菌時(shí)可以進(jìn)入剛果紅染液，在含有纖維素的培養(yǎng)基中加入剛果紅，剛果紅能與培養(yǎng)基中的纖維素形成紅色復(fù)合物，當(dāng)纖維素被纖維素酶分解后，剛果紅-纖維素的復(fù)合物就無(wú)法生形成，培養(yǎng)基中會(huì)出現(xiàn)以纖維素分解菌為中心的透明圈．
（2）微生物純化時(shí)常用的接種方法是平板劃線法或稀釋涂布平板法．固體平板培養(yǎng)細(xì)菌時(shí)，為防止皿蓋上凝結(jié)的水珠滴落在培養(yǎng)基上污染培養(yǎng)基，需要倒置培養(yǎng)．
（3）糖液→發(fā)酵生產(chǎn)乙醇階段需要的菌種是酵母菌．產(chǎn)生乙醇時(shí)要控制的必要條件是18-25℃，無(wú)氧條件．
故答案為：
（1）纖維素    剛果紅  透明圈
（2）平板劃線法   稀釋涂布平板法   防止皿蓋上凝結(jié)的水珠滴落在培養(yǎng)基上污染培養(yǎng)基
（3）酵母菌  無(wú)氧（密閉或密封）

點(diǎn)評(píng) 本題主要考查纖維素分解菌的篩選與培養(yǎng)、酒精發(fā)酵等的知識(shí)，對(duì)相關(guān)知識(shí)點(diǎn)的識(shí)記和理解是解題的關(guān)鍵．